Approche fonctionnelle des thiorédoxines h d'"Arabidopsis thaliana" et caractérisation d'un nouveau type de thiorédoxine

par Dominique Mestres-Ortega

Thèse de doctorat en Bases de la production végétale

Sous la direction de Yves Meyer.

Soutenue en 1998

à Montpellier 2 .


  • Résumé

    Une etude de la reprise de la division cellulaire chez le tabac a montre une forte accumulation de thioredoxine h dans des protoplastes fraichement isoles. Ces proteines, dont la fonction exacte est peu connue chez les vegetaux, sont de petites proteines reductrices dont le site actif consensus est wcgpc. Pour essayer d'approcher leur fonction nous avons decide d'etudier ces proteines chez la plante modele : arabidopsis thaliana. Un adnc a alors ete isole par screening avec la thioredoxine h1 de tabac, et quatre autres clones ont ete identifies a partir des banques de donnees. L'etude de l'activite in vitro des proteines correspondant a ces cinq clones nous a permis de demontrer l'existence d'un nouveau site consensus chez ces proteines qui est wcppc. Une etude de ces genes nous a montre qu'ils etaient peu transcrits et que leurs profils d'expression etaient different. La faible abondance des proteines dans la plante a rendu leur detection difficile, mais nous a quand meme permis de montrer que chacune etait differemment repartie dans la plante. Pour localiser avec precision les lieux d'expression de ces cinq genes et essayer ainsi d'approcher leur fonction nous avons decide de realiser des plantes transgeniques. Les parties 5 non codantes de ces cinq genes ont ete isolees et entierement sequencees. Ils ont ensuite ete utilises pour diriger l'expression du gene gus dans les plantes transformees. L'etude de la localisation de la proteine gus dans la plante nous a permis de confirmer que les cinq genes de thioredoxines h d'arabidopsis etaient exprimes dans des tissus differents, et que certains d'entre eux pouvaient etre lie a des fonctions particulieres dans la plante. La veille des sequences presentes dans les banques de donnees et leur arrangement en sequences continues nous a permis d'identifier quatre adnc de thioredoxines m differents. Jusqu'a present, chez les vegetaux, seul un gene de thioredoxine m avait ete isole par genome. Les thioredoxines m constituent, elles aussi, une famille multigenique. Un screening a faible stringence d'une banque d'adnc de silique nous a permis d'isoler un nouveau clone de thioredoxine. La comparaison de sa sequence avec celle d'e. Coli et celles de thioredoxines m d'arabidopsis et d'autres especes montre que cette thioredoxine a comme ces dernieres des caracteristiques procaryotiques. Nous avons donc isole un nouveau type de gene de thioredoxine present dans les plantes, nous l'avons appele thioredoxine p, trxp.

  • Titre traduit

    Fontionnal approach to arabidopsis thaliana H thioredoxin and characterisation of a novel type of thioredoxin


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Informations

  • Détails : [120] f.
  • Annexes : Bibliogr.: f. 83-92

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  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TS 98.MON-214
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