Production de quatre isoformes de protéines de transfert de lipides du blé dans "Pichia pastoris". Expression des gènes codant ces protéines dans le blé

par Cécile Klein

Thèse de doctorat en Biochimie et biologie moléculaire

Sous la direction de Marie-Françoise Frery.

Soutenue en 1998

à Montpellier 2 .


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  • Résumé

    Les proteines de transfert de lipides (ltp) sont des proteines des faible masse moleculaire qui sont capables de realiser in vitro un transfert de lipides entre deux membranes. Dans le ble, les genes de ltp forment une famille mutigenique et il existe au moins cinq genes de ltp exprimes dans le grain de ble. Dans un premier temps, nous avons utilise le systeme d'expression levurien pichia pastoris pour produire quatre isoformes de ltp de ble dur (triticum durum) et de ble tendre (triticum aestivum). Ce systeme permet de secreter trois ltp recombinantes solubles dans le milieu de culture en quantite variable (1,1 g/l, 700 mg/l et 80 mg/l). Quand l'acide amine n-terminal de la proteine deduite de l'adnc est un residu alanine et non un residu isoleucine, la maturation de la ltp recombinante correspondante est optimale. Nos resultats ont montre qu'il y a une grande diversite de production selon le clone considere et les conditions de cultures utilisees. Dans un deuxieme temps, nous avons suivi l'expression des genes de ltp de ble au cours de la maturation et de la germination du grain de ble dur, et l'effet de stress abiotiques sur l'expression de ces memes genes dans des plantules de ble dur. Au cours de la maturation, ce sont les transcrits des genes ltp4. 90 et ltp8. 3 qui sont les plus abondants. Apres application des stress abiotiques, une variation de la quantite de transcrits des genes ltp6. 48 et ltpd2 est observee dans les pousses. Chaque gene de ltp de ble etudie semble avoir une expression spatiale et temporelle specifique.

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Informations

  • Détails : 167 f., [10] p
  • Annexes : Bibliogr.: f. 142-166

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  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TS 98.MON-65
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