Caracterisation structurale et fonctionnelle d'une nouvelle sous-unite de l'arn polymerase iii de la levure saccharomyces cerevisiae

par STEPHANE CHEDIN

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Jean-Claude Meunier.

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  • Résumé

    L'arn polymerase iii de la levure saccharomyces cerevisiae contient une petite sous-unite essentielle, nommee c11, conservee chez l'homme et dont la sequence peptidique presente de fortes homologies avec celle de tfiis. Un mutant de l'arn polymerase iii heterocomplemente avec la sous-unite c11 de shizosaccharomyces pombe presente, in vivo, un defaut de terminaison de la transcription. La forme purifiee de l'arn polymerase iii depourvue de la sous-unite c11 (arn polymerase iii ) ignore les sites de pause et est affectee dans la terminaison de la transcription in vitro. De facon remarquable, l'arn polymerase iii est depourvue de l'activite intrinseque de clivage de l'arn des arn polymerases iii sauvages. Ces resultats suggerent que l'activite de clivage de l'arn implique la sous-unite c11. Nous avons confirme cette hypothese in vitro par des experiences de reconstitution et in vivo par l'etude de mutants de c11. En effet, la mutagenese de deux residus conserves de la sous-unite c11, qui sont indispensables a l'activite de clivage tfiis-dependante de l'arn polymerase ii, est letale. Des donnees d'immuno-microscopie electronique suggerent que la sous-unite c11 est localisee au niveau de la structure en pouce des arn polymerases. Nous proposons que la sous-unite c11 permet a l'arn polymerase iii de passer d'une conformation elongation a une conformation clivage. En outre, nous suggerons que le role essentiel de l'activite de clivage de l'arn polymerase iii est de ralentir l'arn polymerase iii sur les terminateurs, permettant la mise en place des processus de terminaison.

  • Titre traduit

    Structural and functional characterization of a new rna polymerase iii subunit from yeast saccharomyces cerevisiae


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  • Détails : 274 P.
  • Annexes : 333 REF.

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