Etude des mecanismes de regulation transcriptionnelle par les proteines ebna2, ebna3a et ebna3c du virus d'epstein-barr, trois proteines essentielles a l'immortalisation des lymphocytes b par ebv in vitro

Study of the transcriptional regulation mechanims by the epstein-barr virus ebna2, ebna3a, ebna3c proteins, three proteins necessary for the b lymphocytes immortalization by ebv, in vitro

• Auteur / Autrice : Pierre-Yves Bourillot
• Direction : Alain Sergeant
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées. Psychologie. Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Lyon, École normale supérieure (sciences)

Résumé

Le virus d'epstein-barr est le seul virus humain connu pour immortaliser des lymphocytes b in vitro. Dans les lymphocytes b infectes, les produits de neuf genes viraux sont exprimes. Parmi ces genes, seuls les antigenes nucleaires ebna1, ebna2, ebna3a et ebna3c et la proteine membranaire lmp1 sont necessaires au processus d'immortalisation. Ebna2 est la premiere proteine virale exprimee apres infection. Elle active l'expression de plusieurs proteines cellulaires et de toutes les proteines virales exprimees pendant la latence. Ebna2 est un activateur transcriptionnel, recrute au niveau de ces promoteurs cibles par le facteur cellulaire rbp-jk. Nous avons pu montrer au laboratoire que rbp-jk reprime la transcription dans les cellules de mammiferes, en recrutant un corepresseur, et que ebna2 active la transcription en interferant avec le corepresseur et en amenant un domaine d'activation de la transcription. Les proteines ebna3a et ebna3c repriment l'activation de la transcription par ebna2, ceci en destabilisant la fixation de rbp-jk sur l'adn. Ebna3a peut reprimer la transcription quand elle est ciblee sur l'adn. Comme rbp-jk est un represseur, cette repression pourrait etre due au recrutement de rbp-jk. Nous avons pu caracteriser un domaine represseur dans la proteine ebna3a, different du domaine d'interaction avec rbp-jk. Finallement, afin de replacer dans des conditions plus physiologiques, tous les resultats obtenus avec des promoteurs artificiels, nous nous sommes interesses a l'activation par ebna2 du promoteur viral lmp, et a la repression de cette activation par ebna3a et ebna3c. Nous avons pu montrer que en plus du recrutement par rbp-jk, un facteur de la famille ets semble necessaire a l'activation de ce promoteur par ebna2. Nous avons egalement pu montrer que seule ebna3c, et non ebna3a, semble etre recrutee sur ce promoteur. Ce recrutement semble etre independant de la proteine rbp-jk.