Clonage d'un gene de cobaye apparente a un gene de quiescence et etude de son expression dans l'endometre normal et pathologique

par MYRIAM SALLOT

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Michèle Jouvenot.

Soutenue en 1998

à Besançon .

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  • Résumé

    Nous avons eu 2 objectifs : i) poursuivre la caracterisation de gec1 et gec3 clones grace au criblage, par hybridation differentielle, d'une banque d'adnc preparee a partir de cellules epitheliales glandulaires d'endometre (cege) de cobaye stimulees par estradiol-17 (e#2) plus cycloheximide ; ii) etudier l'expression de l'homologue humain de gec3 dans la lignee rl 95-2 derivee d'adenocarcinome d'endometre et dans des prelevements hyperplasiques et neoplasiques de l'endometre. Gec1, regule positivement par e#2, ne presente pas d'homologie de sequence avec les genes deja repertories. Contrairement a gec1, a l'issu du criblage, gec3 apparaissait regule negativement par e#2. La sequence connue de l'adnc gec3 est de 2491 pb et presente 83% d'identite avec l'adnc d'un gene de quiescence humain, q6. Dans les cege, l'expression de gec3 apparait specifique d'une induction de quiescence. Nous avons mis au point les conditions de synchronisation en g0/g1 des cellules rl 95-2. Dans ces conditions, l'egf ne permet pas une augmentation du nombre de cellules, mais accroit de facon transitoire l'expression de c-fos, c-jun et jun-b et de facon continue celle de c-myc. Par contre, le serum de veau foetal permet une augmentation significative du nombre de cellules et induit l'expression de c-myc de facon transitoire. A l'aide d'antisens anti-myc, nous avons montre que l'expression de c-myc est necessaire mais non suffisante a la proliferation des rl 95-2. L'expression de l'homologue humain de gec3 dans ces cellules ne semble regulee ni par la quiescence, ni par un stimulus mitogene. L'expression de l'homologue humain de gec3 a ete detectee dans 10 des 28 prelevements d'endometre humains hyperplasiques et cancereux etudies. Puisque l'expression de ce gene n'est pas ubiquitaire, elle est vraisemblablement associee a un caractere particulier du prelevement. La poursuite de cette etude permettra de disposer d'un nombre de cas suffisants pour preciser le role de ce gene dans la progression cancereuse. Compte-tenu de sa forte identite de sequence avec q6 et de son induction lors de la privation de serum, gec3 peut etre considere comme un gene implique dans la quiescence et son expression pourrait etre un facteur pronostic dans les pathologies de l'endometre.


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Informations

  • Détails : 309 P.
  • Annexes : 340 REF.

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