Reconstitution de la transmission synaptique cholinergique dans des systemes d'expression heterologues

par ELISABETH BUGNARD

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Yves Dunant.

Soutenue en 1998

à Amiens .

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  • Résumé

    Ce travail a pour but de contribuer a la conprehension des mecanismes intimes de la liberation d'ach grace a leur reconstitution dans 2 systemes cellulaires. Nous avons d'abord tente de developper un modele de synapse cholinergique dans l'ovocyte de xenope. Lors de la coexpresion de canaux calciques de lobe electrique de torpille et de recepteurs nicotiniques en presence de 1. 8 ou de 10 mm de ca#2#+ et/ou de 20 mm d'ach in ovo, des depolarisations de 80 a +20 mv declenchent des courants evoques entrants. Une activite spontanee a aussi ete observee. La nature cholinergique des 2 types d'evenements est incertaine. Une alternative est l'activation de conductances endogenes declenchees par une modification du tau intracellulaire de ca#2#+. En raison de sa mediocre reproductibilite le modele n'est pas exploitable dans l'etat actuel. Ensuite nous avons etudie les modifications morphologiques survenant dans les lignees n18tg-2 et c6-bu-1 capables ou incapables de liberer l'ach. Dans la lignee n18tg-2 la cotransfection de la chat et du mediatophore restaure la synthese et la liberation d'ach (cellules to/9). Les cellules to/9, n18tg-2 natives et transfectees avec la chat seulement sont fixees avant et a differents instants apres stimulation chimique. La densite des imps moyennes augmente 1 min apres stimulation uniquement dans la lignee to/9 puis apparait une nouvelle population de pits dont la taille et le nombre diminuent au cours du temps. Les cellules to/9 presentent au meme moment de nombreuses invaginations et depressions a manteau suggerant un processus d'endocytose. La meme relation imp-liberation d'ach est retrouvee dans les cellules c6-bu-1 non transfectees, dont la membrane est riche en mediatophore. La modification de la distribution des imps dans la membrane des cellules to/9 et c6-bu-1 peut etre attribuee a la presence de cette proteine representant probablement l'image morphologique de la liberation d'ach.


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Informations

  • Détails : 193 P.
  • Annexes : 300 REF.

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  • Bibliothèque : Université de Picardie Jules Verne. Bibliothèque universitaire. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
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