Thèse soutenue

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Auteur / Autrice : Nathalie Gherardi
Direction : MaIthé Corbani
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Pharmacologie moléculaire
Date : Soutenance en 1997
Etablissement(s) : Toulouse 3

Résumé

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Le neuropeptide f8famide (npff) est un neurotransmetteur implique au niveau du systeme nerveux central dans la transmission du message nociceptif. Au niveau peripherique, le npff participe a la regulation de grandes fonctions physiologiques telles que la stimulation du rythme cardiaque et l'inhibition du transit intestinal. Le npff module les systemes opioides exercant son action via des recepteurs propres. Ainsi, il participe aux phenomenes de tolerance et dependance. Depuis la purification du peptide en 1985, aucune donnee moleculaire concernant le precurseur du npff n'est apparue. Dans une premiere partie nous decrivons le bilan des strategies utilisees pour tenter de cloner ce precurseur : hybridation avec des oligonucleotides degeneres, pcr directe, rt-pcr. Ce travail n'a pas permis l'isolement de l'adnc du npff. La seconde partie presente la caracterisation de la liaison du #1#2#5i(1dme)y8fa, agoniste plus resistant aux aminopeptidases au recepteur du npff, dans le bulbe olfactif de souris. Nous avons etudie les effets de sels, l'affinite, les parametres cinetiques de liaison. Le bulbe olfactif de souris contient une population homogene tres abondante de sites de liaison du npff de haute affinite (59,6 fmol/mg proteine, kd = 0,02 nm) couples a une proteine g. Enfin, nous avons montre que npff et (1dme)y8fa stimulent l'adenylate cyclase. Nous avons realise des etudes de relations structure-activite. L'analyse des peptides obtenus par alanine scanning a permis d'approcher l'importance de certains acides amines pour la liaison au recepteur. Le modele mis au point constitue une avancee importante dans l'approche des relations structure-activite du peptide et du recepteur du npff.