Isolement et caractérisation de gènes exprimés à différents stades de croissance et au cours du cycle cellulaire dans des suspensions cellulaires d'Arabidopsis thaliana

par Didier Callard

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Michèle Axelos.

Soutenue en 1997

à Toulouse 3 .


  • Résumé

    Afin d'identifier des genes impliques dans le deroulement du cycle cellulaire, une recherche de genes differentiellement exprimes lors de la reprise de croissance de cellules en culture d'arabidopsis thaliana a ete entreprise en utilisant la methode du mrna differential display. Un clone d'adnc gag1at (growth-associated gene) correspondant a un nouveau gene induit en reprise de croissance et trois clones d'adnc srg1, srg2 et srg3 (senescence-related genes), correspondant a des genes fortement exprimes lors de l'arret de croissance des cellules ont ete isoles. L'etude de l'expression des genes srg a revele que certains processus moleculaires intervenant lors des etapes tardives des processus de senescence des plantes sont conserves en fin de croissance des cellules d'arabidopsis. De plus, la mise en evidence d'une fragmentation de l'adn en nucleosomes et d'une condensation de la chromatine suggere l'existence de processus de mort cellulaire chez les vegetaux, presentant certaines des caracteristiques de la mort cellulaire programmee des cellules animales. La recherche de genes exprimes dans des phases definies du cycle cellulaire a ensuite ete entreprise. Pour cela, une methode permettant d'obtenir un systeme de cellules partiellement synchronisees, par carence en phosphate et traitement par l'aphidicoline, a ete mise au point sur la lignee at112 d'arabidopsis. Six adnc correspondant a des genes fortement exprimes en reprise de croissance et en phase s ont ete isoles par mrna differential display. Deux clones d'adnc ch2bat et ch2avat ont ete caracterises. Le gene h2bat code pour un nouveau membre de la famille des histones h2b. Le produit du gene h2avat constitue le premier variant d'histone de la sous-famille h2a. F/z isole et caracterise chez les plantes. Les autres adnc selectionnes correspondent a des genes nouveaux dont la fonction pourraient etre impliques dans le deroulement du cycle cellulaire.


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Informations

  • Détails : 209 P.
  • Annexes : 418 REF.

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  • Bibliothèque : Université Paul Sabatier. Bibliothèque universitaire de sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 1997TOU30243
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