Bêta-lactamases TEM : bases moléculaires de l'évolution et mécanismes d'inhibition

par Laurent Maveyraud

Thèse de doctorat en Cristallographie biologique et pharmacologie

Sous la direction de Jean-Pierre Samama.

Soutenue en 1997

à Toulouse 3 .

    mots clés mots clés


  • Pas de résumé disponible.


  • Pas de résumé disponible.


  • Résumé

    Les beta-lactamines sont les antibiotiques les plus utilises en therapeutique. Cependant, leur efficacite est sans cesse remise en cause par l'apparition et la dissemination de souches bacteriennes resistantes. Leur resistance resulte generalement de la production de beta-lactamase, une enzyme capable de degrader ces antibiotiques avant qu'ils n'atteignent leurs cibles cellulaires. L'enzyme la plus frequemment isolees chez ces souches resistantes est la beta-lactamases tem-1, tres efficace vis-a-vis des penicillines, mais incapables d'hydrolyser les cephalosporines de troisieme generation (c3g). Cette enzyme est sensible a l'inhibition par l'acide clavulanique. Cependant, elle evolue tres rapidement: quelques mutations ponctuelles lui permettent d'hydrolyser les c3g ou d'etre insensible a l'acide clavulanique. Nous avons initialement aborder les aspects structuraux de l'evolution des beta-lactamases tem vers l'hydrolyse des c3g. La structure cristallographique du mutant e166y de tem-1, ainsi que les donnees cinetiques de differents mutants de cette enzyme, demontrent le role important de la boucle omega (residus 161-179) dans l'extension du spectre de substrats. L'ouverture du site catalytique de l'enzyme, responsable de l'amelioration de l'affinite pour les c3g, est directement correlee a la conformation de cette boucle. Nous nous sommes ensuite interesses a la mise au point d'un inhibiteur efficace de cette enzyme, sur la base de la structure de l'enzyme sauvage et des elements structuraux conduisant aux enzymes a spectre elargi. La structure cristallographique de l'enzyme inhibee par un analogue d'un etat de transition eclaire le mecanisme catalytique de cette beta-lactamase, et designe la molecule d'eau responsable de l'hydrolyse du complexe acyl-enzyme, comme cible la plus accessible pour l'inhibition. Ainsi, la structure de tem-1 inhibee par le 6alpha-hydroxymethyl penicillanate demontre que la reactivite de cette molecule d'eau est affectee par l'inhibiteur. Cet inhibiteur est quasiment aussi efficace sur tem-1 que le meilleur inhibiteur actuellement utilisee en therapeutique

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 174 p

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paul Sabatier. Bibliothèque universitaire de sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 1997TOU30011
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.