Isolement et caracterisation du recepteur aux glucocorticoides chez la truite arc-en-ciel (oncorhynchus mykiss)

par MICHEL TUJAGUE

Thèse de doctorat en Sciences biologiques

Sous la direction de BERNADETTE DUCOURET.

Soutenue en 1997

à Rennes 1 .

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  • Résumé

    L'adnc du recepteur aux glucocorticoides chez la truite arc-en-ciel (rtgr) a ete isole a partir de deux clones chevauchants provenant de banques de foie et d'intestin. D'une taille de 6777 pb, il contient un cadre de lecture codant pour une proteine de 758 residus presentant de fortes similitudes de sequence avec les recepteurs mammaliens aux steroides. Une analyse phylogenetique montre que la sequence rtgr appartient a la sous-famille des recepteurs aux glucocorticoides (gr). L'adnc rtgr a permis la detection par northern d'un arnm de 7,5 kb dans des tissus sensibles au cortisol chez la truite: le foie, le muscle, les branchies, l'intestin et le rein. Au niveau des deux doigts a zinc du domaine de liaison a l'adn, l'identite de la sequence rtgr avec celles des gr mammaliens est de 97%. Toutefois, le recepteur rtgr presente une particularite majeure dans cette region: l'insertion de 9 acides amines entre les doigts a zinc. A l'image des autres recepteurs aux steroides, chacun des doigts a zinc de rtgr est code par un exon, mais la sequence additionnelle de 9 acides amines provient d'un exon supplementaire de 27 pb. Cet exon est situe dans la region mediane d'une sequence intronique de 5 kb separant les deux exons codant pour les doigts a zinc. Le recepteur rtgr, exprime in vitro ou par transfection, presente une forte specificite de liaison et d'action pour les glucocorticoides. Il possede des caracteristiques de liaison a l'hormone et de transactivation differentes de celles des gr mammaliens: premierement, une affinite et une sensibilite plus faible pour la dexamethasone, deuxiemement, une capacite d'induction superieure aux fortes doses d'hormone, et troisiemement, une activite en absence d'hormone. L'analyse d'un mutant de deletion de rtgr a montre que la sequence supplementaire de rtgr ne joue pas un role majeur dans les mecanismes de transactivation. Toutefois, cette sequence pourrait etre impliquee dans l'activite du recepteur en absence d'hormone


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Informations

  • Détails : 150 P.
  • Annexes : 403 REF.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université de Rennes I. Service commun de la documentation. Section sciences et philosophie.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TA RENNES 1997/40
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