Identification-caracterisation des histones de la vigne (vitis vinifera l. ). Mise en evidence d'une relation entre histone linker et developpement de la vigne

par CHRISTOPHE ELIAN REDON

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de ISABELLE LACORRE ARESCALDINO.

Soutenue en 1997

à Reims .

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  • Résumé

    Les histones sont les proteines nucleaires basiques constitutives de la chromatine dont elles forment l'un des deux composants essentiels. Outre leur role structural de condensation de l'information genetique, les histones sont aujourd'hui considerees comme des proteines impliquees dans le metabolisme de l'adn et dans l'expression des genes. Ce double role est atteste par la presence de formes d'histones caracteristiques, voire specifiques de stades du developpement, qu'il s'agisse de la morphogenese ou de la differenciation. Au cours de notre etude, les histones de l'oignon et de la vigne ont ete identifiees et caracterisees par l'utilisation de techniques electrophoretiques en gels de polyacrylamide. Chez ces deux vegetaux, une heterogeneite des histones a ete demontree par la mise en evidence de nombreuses formes, aussi bien de l'histoire linker (histone h1) que des histones de la core-particle (histones h2a, h2b, h3 et h4). L'embryogenese somatique offre des caracteristiques pertinentes pour l'etude du role des histones dans les processus de developpement. Partant, des analyses electrophoretiques ont fait ressortir, au cours de l'embryogenese somatique de la vigne, des transitions majeures au sein des formes de l'histone h1. Sur 5 formes de h1 mises en evidence lors de l'embryogenese, 2 formes sont toujours presentes alors que 3 formes ne sont mises en evidence qu'a certains stades du developpement. Nous avons ensuite eprouve par immunocytochimie la distribution spatio-temporelle des formes d'histones linkers dans les embryons somatiques et les meristemes primaires de vigne. Les tests ont permis de circonscrire les caracteristiques transitoires ou constitutives de certaines histones h1 de vigne et d'etablir une bonne correlation entre processus de developpement et histone linker. Une telle demarche a prealablement exige la mise au point d'outils immunologiques efficaces tels que les sondes homologues que sont les immun-serums specifiques diriges contre certaines histones h1. A l'aide de techniques electrophoretiques semi-preparatives, nous avons pu produire de tels immun-serums. La reponse anticorps, obtenue dans un laps de temps tres court et en partant de tres faibles quantites d'antigenes, represente une amelioration technologique dans l'obtention des anticorps anti-histones.


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  • Détails : 258 P.
  • Annexes : 204 REF.

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