Etude par mutagenese de la regulation de l'operon trp de lactococcus lactis

par HELENE FRENKIEL

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de ALAIN CHOPIN.

Soutenue en 1997

à Paris 11 .

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  • Résumé

    L'operon trp de lactococcus lactis, codant pour les enzymes necessaires a la biosynthese du tryptophane, est precede d'une region leader incluant un promoteur et un terminateur de transcription. La transcription de trp est fortement induite dans les cellules carencees en tryptophane et l'essentiel de ce controle est produit par un mecanisme d'antiterminaison. Des etudes recentes ont montre que l'antiterminaison resultait d'interactions entre le transcrit du leader et l'arnt#t#r#p decharge, selon un mecanisme de regulation connu pour controler plusieurs genes d'amino-acyl-arnt-synthetase et operons de biosynthese d'acide amine chez les bacteries a gram positif. Nous avons cherche, par isolement et caracterisation de mutants de regulation de trp, a identifier d'autres elements impliques dans la regulation par antiterminaison, ainsi que dans d'autres mecanismes secondaires de controle de trp. Un crible a ete mis au point pour la selection de mutants deregules et 66 mutations differentes ont ete caracterisees. Tous les mutants selectionnes comportaient une ou plusieurs mutations dans le terminateur de la region leader, indiquant le role du terminateur dans la regulation de trp. Une region de 27 pb proches du promoteur p#t#r#p, necessaire au controle du demarrage de la transcription, a aussi ete identifiee. Les mutants spontanes de regulation que nous avons obtenus contenaient tous des deletions. Pour obtenir des mutations ponctuelles, nous avons augmente la mutagenese par irradiation u. V. , en presence d'un plasmide codant pour un mecanisme de resistance aux u. V. Ce plasmide diminue le taux de mutants resistants a la rifampicine, ce qui suggere qu'il specifie un element d'un systeme de reparation de l'adn. Nous avons sequence la partie de 5,5 kb de ce plasmide conferant ce phenotype et identifie un cadre ouvert de lecture presentant de l'homologie avec les genes de la famille umuc de e. Coli, impliques dans la mutagenese induite.


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  • Détails : 219 P.
  • Annexes : 209 REF.

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  • Bibliothèque : Université Paris-Sud (Orsay, Essonne). Service Commun de la Documentation. Section Sciences.
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  • Cote : TH2014-013599
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