Contribution a l'etude de la regulation du metabolisme carbone de l'ectomycorhize d'eucalyptus globulus-pisolithus tinctorius. Caracterisation, clonage et expression de l'isocitrate deshydrogenase a nadp de la racine

par VINCENT BOIFFIN

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Francis Martin.

Soutenue en 1997

à Paris 11 .

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  • Résumé

    L'analyse rmn de l'assimilation du 1-#1#3c glucose dans l'ectomycorhize d'eucalyptus globulus-pisolithus tinctorius montre que les teneurs en composes carbones (acides amines et sucres) de la racine et du mycelium sont modifiees par rapport aux partenaires non-associes. Le flux de c (via le cycle de krebs) approvisionne de maniere consequente la synthese de glutamine. Le marquage intramoleculaire de la glutamine fait ressortir l'importance de la fixation anaplerotique du co#2. Ces etudes de marquage isotopique revelent l'interet de l'etude des enzymes a l'interconnexion entre les metabolismes n et c et leur co-regulation dans l'ectomycorhize. La phosphoenolpyruvate carboxylase (pepc) est impliquee dans la fixation anaplerotique du co#2. Cet enzyme est stimule trois fois dans l'ectomycorhize sans augmentation de la concentration du polypeptide, ni variation de l'etat de phosphorylation de l'enzyme. L'isocitrate deshydrogenase a nadp (icdh a nadp) cytosolique fournit l'alpha-cetoglutarate utilise pour l'assimilation de l'azote. L'activite de l'enzyme est stimulee 2,5 fois dans l'ectomycorhize mais sa localisation tissulaire preponderante dans les tissus conducteurs et dans l'epiderme n'est pas modifiee. Afin d'etudier les mecanismes moleculaires impliquees dans la biosynthese de l'icdh a nadp, un adnc pleine longueur (egicdh) a ete clone. L'accumulation des transcrits egicdh est augmentee deux fois dans les ectomycorhizes agees de 2 et 4 jours. La glutamine synthetase (gs) est l'enzyme-clef de l'assimilation de l'ammonium. Avec un fragment d'adnc codant pour une sous-unite de la gs cytosolique (eggs), le niveau de transcrits eggs a ete suivi au cours de la formation de l'ectomycorhize. L'expression du gene eggs est reprimee dans les ectomycorhizes agees de 2 jours. A des stades plus tardifs, elle revient a un niveau comparable de celui de la racine non-inoculee.


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  • Annexes : 387 REF.

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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
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  • Cote : TH2014-013565
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