Analyse de la transposition du retrotransposon de tabac tnt1 dans des hotes heterologues

par FRANK FEUERBACH

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Hélène Lucas.

Soutenue en 1997

à Paris 11 .

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  • Résumé

    Le retrotransposon de tabac, tnt1 transpose chez l'hote heterologue arabidopsis thaliana. Apres induction de la transcription de tnt1, des formes lineaires et des cercles a 1-ltr extra-chromosomiques, produits par transcription inverse du messager de tnt1, sont detectes dans le cytoplasme des cellules de cet hote. L'analyse des copies reverse transcrites demontre que les molecules lineaires possedent, a chacune de leurs extremites, 2 pb supplementaires par rapport aux copies integrees. Avant integration dans le genome de l'hote, 2 nucleotides a chacune des extremites sont elimines comme chez les retrovirus et le retrotransposon ty3 de levure. Dans differents tissus, transcription et transcription inverse sont correlees. Dans les racines, les formes lineaires sont plus abondantes que les cercles. La situation inverse est observee dans les feuilles suggerant l'existence d'un controle tissu-specifique de la replication de tnt1 chez a. Thaliana. La regulation transcriptionnelle de tnt1 a ete modifiee afin de surexprimer cet element dans les feuilles d'a. Thaliana. Les resultats preliminaires obtenus suggerent que dans ce tissu la transposition de tnt1 pourrait etre regulee par un mecanisme d'inactivation transcriptionnelle ou post-transcriptionnelle. Des copies reverse transcrites de tnt1 sont detectees apres introduction de cet element chez s. Cerevisiae. Ces molecules ne sont observees que lorsque l'arnt#i#m#e#t d'a. Thaliana est present dans la cellule, indiquant que cet arnt est utilise comme amorce pour l'initiation de la transcription inverse de tnt1. Enfin, l'expression de la phase ouverte de lecture de tnt1 chez e. Coli a permis de verifier la fonctionnalite de la transcriptase inverse et de la protease codee par cet element et d'identifier le site catalytique de cette derniere.


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  • Détails : 244 P.
  • Annexes : 474 REF.

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  • Cote : TH2014-013531
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