Cdc25p, le facteur d'echange pour les proteines ras chez la levure saccharomyces cerevisiae : localisation, dimerisation et interaction avec des chaperons

par MARCO GEYMONAT

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Michel Jacquet.

Soutenue en 1997

à Paris 11 .

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  • Résumé

    Chez la levure saccharomyces cerevisiae le gene cdc25 code le facteur d'echange pour les proteines ras. Cdc25p est une proteine d'environ 180 kda, elle possede un domaine sh3 et une boite de destruction a cycline, a l'extremite n-terminale. Le domaine catalytique se trouve du cote c-terminal. Cdc25p est fortement associee a la fraction membranaire bien que la sequence primaire ne revele aucun domaine transmembranaire evident. Cdc25p est l'element connu, le plus en amont de la voie ras qui, chez la levure, conduit a l'activation de la proteine kinase dependante de l'amp cyclique (pka). La voie ras-pka est activee, dans des cellules carencees en glucose, par une source de carbone fermentescible. Cdc25 et ras sont des elements essentiels pour cette activation, neanmoins les mecanismes moleculaires qui conduisent a l'activation de cdc25p restent a comprendre. Nous avons etudie la localisation a la membrane de cdc25p et nous avons montre qu'un domaine localise au c-terminal de la proteine (du residu 1441 au 1552) est necessaire et suffisant pour cette localisation. Des etudes d'immunohistochimie ont montre une distribution de cdc25p en petits amas a la peripherie de la cellule. Les proteines ras et ira2 ne sont pas impliquees dans la localisation de cdc25p. Nous avons montre que cdc25p est un dimere et que la dimerisation ne necessite aucune autre proteine de levure. De plus, cdc25p peut former des heterodimeres avec un autre facteur d'echange pour ras : sdc25p. Nous avons recherche des partenaires de cdc25p a la membrane et nous avons montre que le produit du gene ssa1, un membre de la famille des hsp70, interagit specifiquement avec la region c-terminale de cdc25p. De plus, l'interaction avec l'hsp82 a ete aussi mise en evidence. Nous avons mesure l'accumulation de glycogene et trehalose le long de la croissance et analyse la transcription de genes regules negativement par l'ampc dans une souche deletee pour les genes ssa1 et ssa2. Les resultats obtenus montrent que, dans ce contexte genetique, la voie ras-pka est affectee. Cela suggere que les chaperons de la famille des hsp70 sont impliquees dans le controle de la voie ras-pka, probablement au niveau de cdc25p, le facteur d'echange pour ras.


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  • Détails : 171 P.
  • Annexes : 364 REF.

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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
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  • Cote : TH2014-013356
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