Clonage et caracterisation moleculaire du gene hxb responsable de l'activation de deux purine hydroxylases d'aspergillus nidulans

The cloning and molecular caracterization of the hxb gene involved in the activation of two purine hydroxylases in aspergillus nidulans

• Auteur / Autrice : LAILA AMRANI
• Direction : Claudio Scazzocchio
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Chez aspergillus nidulans. La xanthine deshydrogenase catalyse l'hydroxylation de l'hypoxanthine en xanthine et de la xanthine en acide urique. La purine hydroxylase ii catalyse l'hydroxylation du nicotinate en 6-hydroxynicotinate et aussi de l'hypoxanthine en xanthine mais n'accepte pas la xanthine comme substrat. Ces deux enzymes ont un cofacteur a molybdene en commun et ont besoin pour etre actif d'une modification post-traductionnelle assuree par le produit du gene hxb. La voie de degradation des purines est regulee positivement par le produit du gene uay, alors que la voie de degradation du nicotinate est regulee positivement par le produit du gene hxnr et negativement par le produit du gene apla. Le clonage du gene hxb a permis l'etude de la regulation de son expression et la determination de sa sequence. L'etude de la regulation du gene hxb a montre que l'expression de ce gene est sous le controle du produit du gene uay ainsi que de ceux des genes hxnr et apla. De plus, elle est soumise a la repression par l'ammonium via la proteine area regulatrice generale de l'utilisation des sources d'azote. La comparaison de la sequence proteique de hxb avec les banques de sequences proteique a montre une similitude importante avec la proteine nifs d'azotobacter vinelandii et les proteines nifs-like. Par analogie avec la fonction de la proteine nifs, nous avons suggere que la proteine hxb assure la formation d'un groupement mo=s au niveau du cofacteur a molybdene lie initialement a un oxygene. La sequence de certains mutants a ete determinee et montre que la region c-terminale de hxb est tres importante pour la fonction de la proteine.