Contribution a l'etude du role des genes d'adenine phosphoribosyltransferase dans le metabolisme des cytokinines chez les plantes

par Catherine Gaillard

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de MICHEL LALOUE.

Soutenue en 1997

à Paris 11 .

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  • Résumé

    Les cytokinines sont impliquees dans de nombreux aspects de la croissance et du developpement des plantes. Nous avons entrepris de cloner les genes impliques dans l'interconversion entre les formes base, riboside et ribotide des cytokinines dans le but d'elucider leur role dans le transport des cytokinines et la regulation de leurs teneurs dans les plantes. Cette interconversion peut etre assuree par des enzymes de la voie de recuperation des purines. L'apt (adenine phosphoribosyltransferase), qui convertit l'adenine en amp, agit egalement sur les cytokinines. La conversion de la benzyladenine en benzyladenosine-5'-monophosphate est fortement reduite chez le mutant bm3 d'arabidopsis thaliana deficient en activite apt. Ce mutant est male sterile, presente un retard de croissance et est difficile a regenerer en culture in vitro. Trois adnc differents codant pour des apts ont ete identifies chez a. Thaliana. Leur cartographie, comparee a celle du locus bm3, nous a permis de determiner que la mutation affecte le gene apt1. Le sequencage de l'allele apt1-3 du mutant bm3 a revele une mutation ponctuelle au site d'epissage en 5' du troisieme intron. Le gene apt2 a ete caracterise. Il est peu exprime. L'etude de l'expression d'un gene rapporteur gus place sous le controle du promoteur du gene apt2 dans des plantes d'arabidopsis a ete amorcee afin de preciser son profil d'expression. Contrairement a la proteine apt1, la proteine apt2 presente une affinite plus importante pour les cytokinines que pour l'adenine. Des plantes d'a. Thaliana contenant des constructions exprimant des arnm anti-sens du gene apt2 ne presentent pas de phenotype particulier. Des etudes de complementation du mutant apt1-3 ont ete entreprises avec des constructions visant a surexprimer le gene apt2 ou a l'exprimer sous la dependance du promoteur du gene apt1. Ces constructions ont ete introduites dans des plantes d'arabidopsis de type sauvage. Le croisement des transformants primaires contenant les constructions sens et anti-sens avec le mutant apt1-3 permettra d'etudier l'influence du gene apt2 dans le contexte ou le gene apt1 est mute. Afin de faciliter l'etude biochimique de la gametogenese male, la recherche de phenocopies males steriles du mutant apt1-3 a ete entreprise chez nicotiana plumbaginifolia via les strategies de cosuppression et d'expression d'arn anti-sens. Pour cela, deux adnc de n. Plumbaginifolia codant pour des apts ont ete clones par complementation fonctionnelle d'un mutant d'e. Coli. Ces adnc ont ete sequences et sont respectivement homologues aux genes apt1 et apt2 d'a. Thaliana

  • Titre traduit

    Contribution to the study of the role of plant adenine phosphoribosyltransferase genes in the metabolism of cytokinins


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  • Détails : 250 P.
  • Annexes : 410 REF.

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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TH2014-013187
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