Techniques immunologiques appliquees a l'analyse environnementale - immunodosage d'un herbicide modele : l'isoproturon

par SAMY BEN REJEB

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de François Le Goffic.

Soutenue en 1997

à Paris 6 .

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  • Résumé

    L'objet de ce travail est de presenter quelques applications immunochimiques utilisees dans l'analyse environnementale. L'etude a porte sur l'amelioration des qualites d'un immunoadsorbant et le developpement d'un test immuno-enzymatique pour la detection et le dosage d'un herbicide appartenant a la famille des phenylurees pris comme contaminant modele : l'isoproturon. La conception d'une technique reproductible pour la purification specifique des anticorps anti-isoproturon a permis d'ameliorer la qualite de la fraction d'anticorps immobilises sur le support solide de l'immunoadsorbant (multiplication de la capacite et du volume de fin de fixation). Les memes anticorps anti-isoproturon ont conduit a la mise au point d'un test immuno-enzymatique indirect competitif pour la detection et le dosage de cet herbicide dans l'eau. Le recours a la fraction d'anticorps purifiee par la methode de chromatographie d'affinite developpee a ameliore la selectivite du test et sa limite de detection lorsque des echantillons d'eau de riviere sont analyses. Une meilleure correlation (r=0,995) des resultats du test immuno-enzymatique a ete trouvee avec les analyses effectuees par hplc lorsque cette fraction purifiee est utilisee pour la mise en uvre du test. Afin de transposer ce dosage immuno-enzymatique a un format competitif direct utilisable sur le terrain, un nouveau procede d'immobilisation covalente des anticorps a ete mis au point sur support membranaire. Un procede plasma basse pression utilisant des melanges nh#3 et nh#3/h#2 a permis l'incorporation de fonctions amines a la surface de membranes de nitrocellulose. Les immunoglobulines immobilisees par couplage covalent ont montre une retention de leur activite de reconnaissance vis a vis d'analogues enzymatiques de l'isoproturon et le materiau obtenu s'est revele efficace pour la conception de supports membranaires permettant la realisation de tests immunologiques de format utilisable sur le terrain.


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Informations

  • Détails : 298 P.
  • Annexes : 338 REF.

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  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
  • Disponible pour le PEB
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 1997
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