Micro-manipulations de molecules d'adn isolees

par JEAN-FRANCOIS ALLEMAND

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Vincent Croquette.

Soutenue en 1997

à Paris 6 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Dans une premiere partie nous avons determine les conditions permettant d'obtenir une fixation specifique de l'adn par ses extremites sur une grande variete de surfaces. Cette attache peut ensuite etre utilisee pour faire du peignage moleculaire. Le parametre important a controler est le ph de la solution. La plage de ph ou la fixation s'effectue n'est que de 0. 2 unites ph sur les surfaces tres hydrophobes. Nous proposons deux mecanismes pour expliquer cette fixation suivant la nature hydrophobe ou hydrophile de la surface. Dans une deuxieme partie nous presentons une nouvelle technique de mesure de force basee sur le mouvement brownien. Cette technique s'applique a une micro-bille attachee a une surface par une molecule. L'amplitude du mouvement brownien de la bille nous donne acces a la force appliquee sur celle-ci. Cette technique, non-invasive, peu couteuse mais lente, nous a permis de mesurer des forces de 10 femtonewton a plus de 100 piconewton. Nous l'avons appliquee dans une troisieme partie a l'etude de l'elasticite de l'adn surenroule. Pour cela nous avons attache une molecule unique d'adn entre une surface de verre et une micro-bille magnetique. L'application d'un champ magnetique nous permet d'exercer une force sur la bille et donc sur la molecule, et d'imposer une contrainte de torsion sur la molecule. Nous avons ainsi pu produire des surenroulements jamais atteints auparavant. En faisant cela nous avons mis en evidence de nouvelles structures avec en particulier pour des surenroulements positifs une structure ayant probablement ses bases exposees.


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Informations

  • Détails : 119 P.
  • Annexes : 51 REF.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 1997
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