Phospholipase a2 secretee plaquettaire : origine cellulaire, role dans la liberation de l'acide arachidonique et modulation de son activite

par SHARAREH EMADI

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Mohamed Hatmi.

Soutenue en 1997

à Paris 6 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Les plaquettes constituent une population heterogene de cellules produites a partir de cellules geantes de la moelle osseuse, les megacaryocytes. Elles jouent un role determinant dans l'hemostase, la thrombose et elle participent largement a la reaction inflammatoire. La reponse plaquettaire est modulee par de nombreuses enzymes assurant la transduction du signal. Les plus importantes sont les phospholipases (pl)a2 et c. Deux types de pla2 sont actuellement bien definis dans les plaquettes : une forme cytosolique (cpla2, 85 kda) et une forme secretee (spla2, 14 kda). Nous avons demontre, pour la premiere fois, l'expression d'arnm codant pour la spla2 dans les plaquettes et dans les cellules hel (human erythroleukaemia cells) ayant des caracteristiques megacaryocytaires. La proteine spla2 presente de maniere constitutive dans ces deux types cellulaires, est aussi exprimee dans les megacaryocytes humains. L'expression plaquettaire de cette enzyme aux stades transcriptionnel et post-transcriptionnel est en faveur de son origine megacaryocytaire. En outre, l'incubation des plaquettes avec la spla2 recombinante humaine ne montre aucune endocytose, renforcant ainsi ce concept. L'enzyme liberee au cours de l'activation plaquettaire et de cellules hel est en majeure partie adsorbee a la membrane cellulaire, vraisemblablement sur des sites non-specifiques. Par ailleurs, nous avons montre que la spla2 contenue dans les plaquettes au repos, ne participe pas a la liberation de l'acide arachidonique bien qu'elle soit liberee dans le milieu extracellulaire au cours de l'activation. En effet, des plaquettes activees par le u46619, un mimetique du thromboxane a2, liberent d'importantes quantites de spla2 sans liberation detectable d'acide arachidonique. Nous avons confirme, dans une autre serie d'experiences, que la plc ne joue pas un role majeur dans la liberation de cet acide gras qui serait essentiellement libere par la cpla2. La stimulation des plaquettes par le u46619, est associee a l'activation de la plc mais pas a celle de la cpla2 montrant, ainsi, l'independance de ces deux voies enzymatiques. Enfin, nous avons demontre que la protamine, une proteine riche en acides amines basiques (arginine et lysine), inhibe, de facon reversible, l'activite de la spla2. L'heparine qui a une forte affinite pour cette enzyme n'exerce aucun effet par elle-meme mais elle s'oppose, neanmoins, a l'effet inhibiteur de la protamine. La protamine inhibe non seulement l'activite enzymatique de la spla2 mais aussi sa liberation par des plaquettes activees.


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  • Détails : 219 P.
  • Annexes : 553 REF.

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  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
  • Disponible pour le PEB
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 1997
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