Study of the p143 helicase gene role in the specificity of the baculoviruses belonging to the autographa californica nucleopolyhedrovirus group

Etude du rôle du gène de l'hélicase p143 des baculovirus du groupe du virus de la polyédrose nucléaire d'"Autographa californica" dans la spécificité d'hôte

• Auteur / Autrice : Olivier Argaud
• Direction : Guy Croizier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Montpellier 2

Mots clés

Mots clés contrôlés

Relations hôte-virus

Vers à soie

Recombinaison génétique

Baculoviridés

Résumé

Le gene de l'helicase p143 du baculovirus de la polyedrose nucleaire d'autographa californica (acmnpv) est un determinant de la specificite. La modification de ce gene par recombinaison intragenique avec le gene p143 homologue du virus de bombyx morinpv nous a permis de creer des virus acmnpv capables d'infecter les cellules bm5 et les larves de bombyx mori non permissives au virus acmnpv de type sauvage. Le stade de blocage du cycle viral d'acmnpv sur les cellules de b. Mori se situe tardivement dans la replication de l'adn comme nous le montrent la cytometrie de flux et les experiences de southern. La localisation de sequences du gene p143 d'acmnpv dont la modification permet au virus de se multiplier sur les cellules de b. Mori a ete realisee par recombinaison genetique puis par mutagenese dirigee. Deux mutations d'acides amines (s564n et f577l) dans p143 jouent un role essentiel dans l'adaptation du cycle viral d'acmnpv aux cellules de b. Mori. L'etendue exacte de la region du gene p143 conduisant a des modifications de specificite reste a etablir. Pour faciliter l'etude de la region de specificite nous avons mis au point une technique de transplacement de fragments de genes. La localisation puis le sequencage des genes p143 des virus de bmnpv sc7 et rachiplusia ou mnpv r1 ont permis d'effectuer une comparaison des sequences avec les genes d'helicases des baculovirus deja caracterises. Enfin nous avons montre par remplacement de sequences que la region du genome de bmnpv contenant le gene de p143 est capable de debloquer le cycle des baculovirus romnpv et gmmnpv (proches d'acmnpv) sur les cellules de b. Mori.