Elaboration et caractérisation d'assemblages phospholipidiques de type Langmuir-Blodgett contenant l'acétylcholinestérase

par Marilyse Leonard-Latour

Thèse de doctorat en Sciences. Biochimie

Sous la direction de Pierre Coulet.

Soutenue en 1997

à Lyon 1 .

Le président du jury était Pierre Coulet.


  • Résumé

    Ce travail concerne l'elaboration de membranes biomimetiques planes, possedant des proprietes specifiques de reconnaissance moleculaire, deposees sur un support solide par la technique de langmuir-blodgett. Les conditions d'obtention de multicouches de langmuir-blodgett a partir d'acides gras ou de phospholipides ont ete optimisees en modifiant la nature (ph et cations) de la phase aqueuse sur laquelle est formee la monocouche. Une correlation etroite a ete etablie entre la composition ionique de la phase aqueuse, le degre d'ionisation de la monocouche, sa stabilite et l'homogeneite des multicouches transferees au moyen de techniques d'analyse telles que la microscopie nomarski et la spectroscopie infrarouge a transformee de fourier. En vue d'etudier la fluidite des multicouches phospholipidiques, une sonde fluorescente indicatrice de fluidite membranaire a ete incorporee dans la monocouche. L'influence de cette sonde sur les proprietes de la monocouche et l'homogeneite des multicouches depend de sa concentration. Le comportement fluorescent de la sonde au sein des multicouches differe de celui observe au sein de liposomes du fait de la rigidite de l'assemblage depose sur support solide. Nous avons etudie les conditions de formation et de transfert d'un film interfacial a partir d'une suspension liposomale deposee sur une monocouche de langmuir faiblement comprimee a l'interface air/eau. Par cette methode, un film proteo-phospholipidique a ete forme puis transfere sur un support solide permettant d'obtenir des multicouches phospholipidiques contenant une enzyme, l'acetylcholinesterase. L'activite de l'enzyme ainsi immobilisee a ete detectee par un biocapteur amperometrique a choline, indiquant que l'acetylcholinesterase a ete retenue active et que la couche sensible presente des proprietes de reconnaissance moleculaire.

  • Titre traduit

    Building up and characterization of langmuir-blodgett phospholipidic multilayers containing acetylcholinesterase


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Informations

  • Détails : 1 vol. (ix-229 p.)
  • Annexes : Bibliogr. p. 215-229

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  • Bibliothèque : Université Claude Bernard (Villeurbanne, Rhône). Service commun de la documentation. BU Sciences.
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