Développement d'une méthode associant chromatographie liquide et électrophorèse capillaire en vue de l'analyse des peptides dans les milieux biologiques

par Dominique-Anne Hermouet-Bernard

Thèse de doctorat en Sciences

Sous la direction de Luc Denoroy.

Soutenue en 1997

à Lyon 1 .

Le jury était composé de Luc Denoroy.


  • Résumé

    Le but de cette theseaa ete de developper une methode associant extraction sur phase solide, chromatographie liquide a polarite de phase inversee et electrophorese capillaire de zone (cze), en vue d'analyser les neuropeptides contenus dans des milieux biologiques. Des protocoles d'extraction bases sur l'echange d'ions, la phase inverse ou la chromatographie d'affinite sur metal immobilise ont ete etudies. Ensuite, l'analyse par cze a ete optimisee afin de pouvoir realiser les separations pour differents ph du tampon electrolyte. L'angiotensine ii, l'arginine vasopressine et la neurotensine (nt) migrent pour des ph compris entre 2,5 et 10,5 et leur pi peut etre determine a partir des courbes =f(ph). Par contre, la substance p, le neuropeptide y, le peptide histidine isoleucinamide et le peptide intestinal vasoactif (vip) ne migrent que dans la zone de ph acide ou basique, et interagissent avec la paroi du capillaire a ph neutre. Les courbes 1/t=f(e) suggerent que ces interactions sont surtout liees a des interactions coulombiennes entre la paroi du capillaire et les peptides. Afin de diminuer ces interactions, une etude comparative de differents additifs a ete effectuee. La lysine et le cyclen se sont reveles les plus efficaces. Les courbes f/t=f(e) suggerent que ces deux additifs agissent differemment. L'approche developpee a ete utilisee pour analyser la nt et la vip dans des tissus de rat. Les separations cze ont ete effectuees dans differents tampons de separation, permettant ainsi d'identifier sans ambiguite ces neuropeptides.


  • Pas de résumé disponible.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. (103 f.-[11] f. de pl.)
  • Annexes : Bibliogr. non paginée [7] f.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Claude Bernard (Villeurbanne, Rhône). Service commun de la documentation. BU Sciences.
  • Disponible pour le PEB
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.