Analyses de la structure des intermédiaires de la réplication de l'ADN du virus Herpes simplex de type 1

par Dominique Bataille

Thèse de doctorat en Sciences. Différenciation, génétique et immunologie

Sous la direction de Alberto-Luis Epstein.

Soutenue en 1997

à Lyon 1 .

Le jury était composé de Alberto-Luis Epstein.


  • Résumé

    Le theme de cette these est l'etude des intermediaires de la replication du virus herpes simplex de type 1 (hsv-1), dans le but de mieux caracteriser le mecanisme par lequel ce virus synthetise son adn. Lors de l'initiation de ce travail, il etait admis que hsv-1 repliquait son adn selon le modele du cercle roulant, generant de longs concatemeres lineaires. Cependant, ce modele n'avait pas ete demontre directement en raison de la grande taille du genome hsv-1. La technique d'electrophorese en champs pulses m'a permis de separer l'adn des unites genomiques de celui constituant les intermediaires de replication, afin d'analyser ces derniers. Les resultats obtenus confirment que les structures replicatives sont sous forme de concatemeres. Cependant des inversions de composantes l adjacentes sont retrouvees en proportion equimolaire au sein des concatemeres. L'etude de souches hsv-1 mutantes montre que ces inversions se produisent tot dans le cycle viral et sont responsables du phenomene d'isomerisation genomique. De plus, les analyses en pfge revelent que la majeure partie des intermediaires de replication se trouve sous la forme d'une structure complexe, non lineaire, probablement constituee d'adn branche. L'ensemble de ces observations concernant la structure des intermediaires de replication ne peut etre explique par le mecanisme du cercle roulant classique, qui doit donc etre revu, et implique probablement que des phenomenes de recombinaison soient constitutivement lies a la synthese de l'adn viral. Le role dans le cycle viral des topoisomerases de type i et ii cellulaires a aussi ete evalue. Ces enzymes apparaissent necessaires a la production de particules infectieuses, probablement en intervenant sur differentes etapes de la maturation de l'adn. Cependant, aucune d'entre elles ne semble strictement requise ni pour la formation des inversions genomiques, ni pour la resolution des structures complexes.


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Informations

  • Détails : 1 vol. (191 f.)
  • Annexes : Bibliogr. f. 157-182 et notes bibliographiques dans chaque article

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