Recherche Avancée

Thèse soutenue

Isolement de nouveaux gènes régulés par l'éthylène chez la tomate (L. Esculentum) par criblage de cDNA issus du differential display

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Auteur / Autrice : Hicham Zegzouti
Direction : Mondher Bouzayen
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Biologie moléculaire et cellulaire végétale
Date : Soutenance en 1997
Etablissement(s) : Toulouse, INPT

Résumé

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Les plantes montrent une grande diversite de reponses physiologiques a l'ethylene selon le stade de developpement. En plus de son role majeur dans le controle de la maturation des fruits, l'ethylene intervient dans les processus de germination, de croissance, et d'abscission des fleurs et des feuilles. La diversite et l'ampleur des reponses physiologiques et biochimiques des fruits a l'ethylene suggerent que cette hormone controle l'expression d'un grand nombre de genes. Au cours de la derniere decennie, plusieurs genes regules par l'ethylene ont ete isoles. Dans le but de poursuivre l'etude des mecanismes moleculaires impliques dans la reponse a l'ethylene, nous avons entrepris l'isolement des genes repondants precocement a cette hormone chez la tomate en utilisant une nouvelle approche basee sur l'amplification par pcr appelee differential display et qui permet la comparaison des profils d'expression des arn messagers. La premiere partie de ce travail est consacree a la mise au point d'une strategie de criblage des clones differentiels permettant d'eliminer les faux positifs generes en forte proportion par l'etape du differential display. Au cours de ce travail, un grand nombre de cdnas repondant precocement a l'ethylene (clones er) a ete isole chez la tomate. Parmi ceux-la, 17 cdna correspondent a de nouveaux genes regules par l'ethylene montrant trois types differents d'expression: (i) une induction progressive par l'ethylene, (ii) une inhibition progressive par l'ethylene, et finalement (iii) une induction transitoire. L'addition du 1-methyl-cyclopropene, un puissant inhibiteur de l'action de l'ethylene, supprime completement l'effet de l'ethylene sur l'expression de ces genes. L'analyse structurale des sequences montre que plusieurs de ces clones ne possedent pas d'homologies significatives avec des genes connus. Parmi les clones transitoirement exprimes er5 a fait l'objet d'une etude specifique. Il possede une forte homologie avec un gene appartenant au groupe hydrophobe de la famille des lea proteines