Etude de deux genes photocontroles : seca et ruvb, chez synechocystis pcc6803

par STEPHANE BULTEAU

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de CLAUDE GAILLARDIN.

Soutenue en 1997

à l'INA .

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  • Résumé

    L'isolement aleatoire, chez la cyanobacterie synechocystis pcc6803 (s. 6803), de cinq promoteurs photocontroles lr1-5, a partir d'une banque d'adn genomique, nous a conduit a determiner le premier motif nucleotidique : g(g/a)n#5aac, implique dans la photoinduction de promoteurs cyanobacteriens. Grace au vecteur replicatif et ubiquitaire de test des promoteurs : psb2a, que nous avons construit, nous avons montre que lr1 est egalement photocontrole dans une cyanobacterie phylogenetiquement eloignee de s. 6803 : synechococcus pcc7942. En sequencant la region du genome de s. 6803 (8 kb) qui porte le promoteur lr1, nous avons identifie deux genes photocontroles : seca et ruvb. Nous avons montre que le gene seca, qui interviendrait dans le transport de proteines dans les membranes photosynthetiques, est essentiel a la survie cellulaire, et que l'abondance de ses transcrits augmente avec l'intensite de l'eclairement. L'analyse de la region promotrice de seca avec le vecteur psb2a confirme la photoinduction de l'expression du gene seca et revele la structure complexe de son promoteur. Celui-ci comprend successivement un element stimulateur, le promoteur basal et constitutif, puis un element inhibiteur, et enfin un deuxieme element stimulateur qui coincide avec le debut de la region codante de seca. Les deux elements stimulateurs interviennent de facon synergique pour produire la photoinduction maximale. Nous avons egalement montre que s. 6803 est radioresistante et amorce l'analyse de ce phenomene en etudiant le gene ruvb de cet organisme. Contrairement au gene ruvb des bacteries heterotrophes, celui de s. 6803 n'est pas en operon avec ruva. Cependant, comme son homologue chez e. Coli, le gene ruvb cyanobacterien est unique et non essentiel, il intervient dans la tolerance aux uv-c et au stress oxydatif, et dans la recombinaison homologue, et il est induit par les uv-c. Ceci suggere l'existence d'un systeme sos chez s. 6803.


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  • Détails : 178 P.
  • Annexes : 326 REF.

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