Cisp/thrombospondine-2 : une proteine synthetisee par les cellules corticosurrenaliennes en reponse a l'acth. etude comparative de la regulation de l'expression de cisp/tsp2 avec tsp1 et distribution tissulaire de tsp2

par BRUNO LAFEILLADE

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de JEAN JACQUES FEIGE.

Soutenue en 1997

à l'Université Joseph Fourier (Grenoble) .

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  • Résumé

    L'acth induit la synthese par les cellules corticosurrenaliennes bovines (bac) d'une proteine trimerique de 600 kda, appelee cisp pour corticotropin induced secreted protein. Des anticorps polyclonalux anti-cisp ont ete produits chez le lapin et un fragment d'adnc de 386 pb a ete amplifie par pcr et sequence. Ce fragment code 128 acides amines n-terminaux et presente 87 % d'identite avec la sequence de thrombospondine-2 (tsp2) humaine. Cet amplicon utilise comme sonde nucleique en northern blot detecte un arn messager de 6. 0 kb, dont la synthese est induite par l'acth. Une sonde nucleique specifique de tsp1 bovine a egalement ete developpe. L'etude de la regulation de l'expression de cisp/tsp2 et de tsp1 par les cellules bac a montre un effet oppose de l'acth avec (1) une augmentation de l'expression de cisp et une diminution de celle de tsp1, (2) une induction precoce par le serum de la synthese de tsp1 (3) une induction de l'expression de tsp1 et de tsp2 par tgf-b1. Dans les cellules bac traitees par l'acth, cisp est localisee au niveau de l'appareil de golgi comme le montrent les experiences d'immunofluorescence. L'emploi de l'anticorps anti-cisp a permis de montrer que cisp est necessaire au maintien de l'arrondissement cellulaire induit par l'acth. Dans la lignee de cellules d'osteosarcome ros, une inhibition de l'expression de tsp1 par l'ampc et la parathormone a ete observee. En revanche, l'induction de cisp par l'ampc n'est pas retrouvee dans ce modele, suggerant une regulation specifique aux cellules bac. In vivo, cisp peut etre extraite de differents tissus bovins, dont la surrenale. Plus precisement, en immunofluorescence, cisp est localisee au niveau du cortex surrenalien, dans la zone glomerulee et la zone fasciculo-reticulee. La presence de cisp a egalement ete retrouvee dans les tumeurs de la surrenale, sans difference d'expression detectee selon la malignite de la tumeur. L'existence d'une regulation differentielle de l'expression de tsp1 et de cisp/tsp2 est en faveur de roles distincts de ces deux thrombospondines et suggere que les cellules corticosurrenaliennes ainsi que les cellules ros representent de bons modeles d'etude des fonctions de tsp1 et de tsp2.

  • Titre traduit

    Cisp/thrombospondin-2 : a protein synthesized by adrenal cells in response to acth. A comparative study of regulation of cisp/tsp2 and tsp1 expressions and tsp2 tissue distribution


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  • Détails : 152 P.
  • Annexes : 579 REF.

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