Clonage, séquençage, expression de protéines sécrétoires pancréatiques de porc

par Sophie Darnis

Thèse de doctorat en Biochimie. Nutrition, aspects moléculaires et cellulaires

Sous la direction de Jean-Claude Chaix.

Soutenue en 1997

à Aix-Marseille 3 .


  • Résumé

    Au cours de ces dernières années, des banques d'ADN complémentaires de pancréas ont été obtenues chez le rat, le boeuf et l'homme. Toutefois, aucune approche moléculaire de cet ordre n'a été développée chez le porc pourtant considéré, à divers égards, comme un bon modèle expérimental. Nous avons construit une banque d'ADNc de pancréas de porc et nos recherches se sont focalisées sur l'a-amylase, le chymotrypsinogène C et la carboxypeptidase A. Les séquences nucléotidiques complètes de ces clones ont été déterminées et les séquences peptidiqués déduites ont permis soit d'affiner les séquences déjà publiées soit d'établir pour la première fois leur structure primaire. La séquence peptidique de l'a-amylase déduite de l'ADNc et la séquence obtenue par voie chimique diffèrent de 18 résidus d'acides aminés. Ces résultats valident les modifications proposées à partir des études cristallographiques et confortent l'hypothèse d'une séquence commune pour les deux isoformes pancréatiques. Les séquences nucléotidique et peptidique du chymotrypsinogène C sont décrites pour la première fois dans ce travail. Un pourcentage d'identité très élevé est trouvé avec les caldécrines et la famille des élastases, en particulier celle de type IV de rat, suggérant que ces protéines sont apparentées. L'analyse de la séquence peptidique de la carboxypeptidase A déduite de l'ADNc indique que le peptide d'activation est identique à celui déterminé par voie chimique sur l'isoforme A et qu'il s'agirait plus particulièrement de l'isoforme Al. . .


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Informations

  • Détails : 137 p.
  • Notes : Thèse confidentielle à vie
  • Annexes : Bibliogr. p. 121-137

Où se trouve cette thèse\u00a0?

  • Bibliothèque : Université d'Aix-Marseille (Marseille. Saint-Jérôme). Service commun de la documentation. Bibliothèque de sciences - Inspé.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : T 2957
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