Isolement et caractérisation de bactéries lipolytiques thermophiles : purification d'une estérase thermostable

par Ali Kademi

Thèse de doctorat en Océanologie

Sous la direction de Jacques C. Baratti.

    mots clés mots clés


  • Résumé

    L'objectif general de ce travail est la recherche de nouvelles esterases/lipases thermostables en vue d'applications biotechniques en particulier en chimie fine. Pour cela, nous avons choisi d'isoler du sol de nouvelles bacteries thermophiles, de caracteriser leurs proprietes microbiologiques, de purifier et de caracteriser une esterase thermostable issue d'une de ces bacteries. Un total de 39 souches ont ete isolees a 50c, a partir d'echantillons de sol, en utilisant une culture d'enrichissement sur un milieu mineral contenant de la trioleine comme source de carbone et d'energie. Ces souches sont caracterisees par une croissance rapide (temps de generation compris entre 20 et 40 minutes) et elles possedent une activite enzymatique qui hydrolyse le caprylate de p-nitrophenyle (pnpc8). La souche mas2 (bacillus circulans) possede a la fois une activite esterase (dosee sur le pnpc8) localisee dans la surnageant de culture et dans la fraction cellulaire soluble, et egalement une activite lipase (dosee sur le pnpc16) localisee dans la fraction membranaire. L'influence de la composition du milieu de culture sur la croissance et la production enzymatique chez la souche mas2 montre que l'activite est constitutive et non reprimee par la presence de glucose. La souche croit entre 35c et et 55c et entre ph 6 et 8,9. Il s'agit donc d'une thermophile moderee relativement alcalophile. L'esterase de cette souche est purifiee jusqu'a homogeneite. Cette esterase est un trimere de 94 kda avec une specificite marquee pour les esters d'acide gras a chaine courte (c3-c4) et moyenne (jusqu'a c8). L'activite est maximale a 55c et a ph 9,0-9,7. Elle est stable a 60c pendant 1 h et aux ph alcalins. L'etude de l'influence des effecteurs montre la presence d'une serine dans le site actif et l'importance des groupements sh pour l'activite. L'ensemble des proprietes etudiees montre que l'esterase de b. Circulans est une nouvelle esterase appartenant a la famille des carboxylesterases. Cette enzyme presente des potentialites interessantes en vue d'applications biotechnologiques.

  • Titre traduit

    Isolation and characterization of thermophilic lipolytic bacteria : purification of thermostable esterase


  • Pas de résumé disponible.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. ( 132 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr.: p. 118-132

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Aix-Marseille (Marseille. Luminy). Service commun de la documentation. Bibliothèque de sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : L28429
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.