Isolement et caracterisation de nouvelles sequences promotrices de levure applicables a la production de proteines heterologues d'interet industriel

par VALERIE NACKEN

Thèse de doctorat en Biotechnologie

Sous la direction de Régine Losson.

Soutenue en 1996

à l'Université Louis Pasteur (Strasbourg) .

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  • Résumé

    Pour repondre aux besoins croissants en production industrielle de proteines heterologues dans la levure, une etude a ete realisee pour isoler de nouveaux fragments promoteurs efficaces en plasmides d'expression a tres hauts taux de copies. Trois inserts promoteurs nommes d64, j1 et r13, efficaces en systemes multicopies d'expression, ont ete isoles a partir d'une banque d'adn enrichie en chromosome ix de saccharomyces cerevisiae. D64 et j1 seraient localises sur le chromosome xvi de levure et l'insert r13 appartiendrait au chromosome ix. Deux des trois inserts, j1 et r13, s'hybrident aux regions 5' non-codantes de genes a intron codant pour des proteines ribosomales. La force promotrice et le mode eventuel de regulation de chacun des trois inserts isoles ont ete estimes en systeme monocopie d'expression d'un gene rapporteur heterologue. Les inserts d64 et j1 presentent une activite promotrice moyenne, inferieure a celle evaluee pour l'insert r13, qui presente, lors de cultures a faible densite cellulaire, une efficacite equivalente a celle du promoteur fort ptef1. Enfin, les trois inserts promoteurs ont montre leur efficacite pour l'expression heterologue, dans chacun des trois systemes plasmidiques a taux de copies variables: ars/cen-ura3 (unique), 2-ura3 (moyen) et 2-ura3-d (haut). Pour les trois inserts promoteurs d64, j1 et r13, combines a un taux de copies plasmidiques donne, une variation graduelle de l'expression genique peut etre obtenue sur un intervalle de deux log

  • Titre traduit

    Cloning and characterisation of new yeast promoter sequences useful for industrial production of heterologous proteins


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Informations

  • Détails : 161 P.
  • Annexes : 206 REF.

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  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Danièle Huet-Weiller.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : Th.Strbg.Sc.1996;2288
  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Danièle Huet-Weiller.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : H 503.000,1996
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