Clonage et caractérisation de gènes exprimés au cours de l'embryogénèse précoce d'Arabidopsis thalina

par Valérie Hecht

Thèse de doctorat en Physiologie et biologie moléculaire végétales

Sous la direction de M. DELSENY.

Soutenue en 1996

à Perpignan .


  • Résumé

    Afin d'etudier l'embryogenese zygotique d'arabidopsis thaliana, nous avons utilise une strategie de piege a promoteur. Une collection de 750 lignees d'arabidopsis a ete generee. Le construit adn-t, contient entre les bordures gauche et droite, un gene conferant la resistance a la kanamycine et le gene uida depourvu de promoteur. Les transformants ont ete cribles pour leur activite gus dans les graines et les siliques. Nous nous sommes plus particulierement interesses a la lignee 276s, qui presente uniquement une activite gus au niveau des cellules du suspenseur du stade preglobulaire au stade cur tardif. Nous avons isole par pcr inverse, clone et sequence, l'adn vegetal adjacent a la bordure gauche, qui nous a servi de sonde pour les hybridations de type southern et pour cribler une banque d'adn genomique. Ce fragment est present sous forme de copie unique dans le genome d'arabidopsis. L'analyse des sequences genomiques a permis l'identification d'un locus contenant trois genes, gene 1, gene 2, gene 3. Le gene 2 est etiquete par l'insertion de l'adn-t. Nous avons produit des plantes transgeniques avec une fusion entre le gene rapporteur uida et la region 5' du gene 2. Ces plantes montrent une meme activite gus au niveau temporel que la lignee de depart 276s, mais la specificite tissulaire n'est pas retrouvee. Le gene 1 code une rna binding protein du type rrm (motif de reconnaissance des arn). L'expression de ce gene est detectee dans les petales, carpelle et etamines, mais egalement au niveau de l'embryon precoce. Le gene 3 presente une forte similarite avec les thioredoxines vegetales


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Informations

  • Détails : 155 f
  • Annexes : 395 REF.

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  • Cote : TH 1996 HEC
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