Les glycosyltransferases : etude de selectivite et utilisation dans la synthese des oligosaccharides bioactifs. approche enzymatique pour la synthese du ganglioside g#m#3

par ABDELOUHAB SABRI

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de C. AUGE.

Soutenue en 1996

à Paris 11 .


  • Résumé

    Au cours de ce travail, nous avons mis en place des methodes optimales pour la purification de l'alpha(2,3)sialyltransferase de foie de porc. Nous avons etudie les proprietes de cet enzyme en particulier, l'immobilisation, la stabilite et la specificite vis a vis de l'accepteur. Nous avons realise la synthese du trisaccharide comportant l'acide n-glycolylneuraminique par reaction croisee de l'alpha-(2,3)sialyltransferase sur le disaccharide gal-beta-(1,3)glenac-para-me-obn. Nous avons fucosyle le trisaccharide par l'alpha-(1,4)fucosyltransferase extraite du lait humain et avons synthetise un analogue de l'antigene sialyl lewis#a tetrasaccharide. Nous avons emis des hypotheses sur l'origine de la forte secretion de l'antigene ca 19-9 (sialyl lewis#a) dans les cultures de cellules cancereuses humaines du colon, sw1116, en presence d'acide retinoique. Nous avons tente de purifier la sat-1 a partir de foie de porc afin de synthetiser le ganglioside g#m#3, et dans ce but nous avons prepare un gel d'affinite. L'activite enzymatique s'est revelee trop faible et trop instable. Nous avons realise le transfert de l'acide sialique a partir du donneur neu5ac-alpha-(2,3)gal-beta-(1,3)gal(2oac)-beta-ome, sur le lactosylceramide pour synthetiser le ganglioside g#m#3 par la trans-sialidase soluble de trypanosoma cruzi. L'enzyme immobilise sur concanavaline a-sepharose 4b s'est revele inactif. Nous avons explore une nouvelle voie permettant de realiser le couplage sucre-ceramide qui repose sur l'utilisation de la ceramide glycanase isolee de sangsues commerciales hirudo medicinalis


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Informations

  • Détails : 148 P.
  • Annexes : 162 REF.

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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TH2014-012926
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