L'embryogenese somatique chez la patate douce (ipomoea batatas (l. ) lam. , convolvulacees) : induction et maintien des structures embryogenes, caracterisation de proteines associees

par JOAO M. CAVALCANTE ALVES

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de S. DARASHIN.

Soutenue en 1996

à Paris 11 .

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  • Résumé

    Un protocole effectif d'induction de l'embryogenese somatique et de culture de protoplastes a ete developpe, en vue de l'application des nouvelles techniques pour l'amelioration de la patate douce. La conversion en plantes des embryons somatiques a ete sensiblement amelioree par l'incubation des embryons immatures, notamment ceux au stade globulaire, dans un milieu contenant une combinaison de 1 m de 2,4-d et de 1 m de kinetine, avant leur transfert sur un milieu sans regulateurs de croissance. L'evaluation des potentialites embryogenes chez 10 clones de patate douce (ipomoea batatas) a montre un effet tres significatif du genotype. La frequence de reponse embryogene varie de 0 a 17%, dependant du genotype. Les cals embryogenes et leurs potentialites de regenerer ont ete constamment maintenus depuis plus de 4 ans. Cependant, apres plusieurs repiquages, 0,1 a 12% des cals embryogenes deviennent non-embryogenes et friables, perdant ainsi definitivement leur capacite a regenerer. L'analyse des isozymes de prx, est, got et acp a montre que cette reversion en cals non-embryogenes pouvait etre associee a une perte de bandes ou a une baisse d'activite des isozymes. L'examen des profils de differentes structures semble suggerer que les est, got et acp seraient impliquees dans l'organisation des tissus, et que les prx dans la differenciation des embryons somatiques. Finalement, l'etude des proteines associees, notamment la nucleoside diphosphate kinase (ndpk) et la phosphoenolpyruvate carboxylase (pepc), qui sont liees aux signaux de transduction et au controle du metabolisme cellulaire, a permis de montrer leur implication importante dans le phenomene de differenciation cellulaire et les evenements embryogenes notamment. En effet, la surexpression de l'activite enzymatique de la ndpk dans les cals embryogenes et la presence d'une bande correspondant a un polypeptide d'un poids moleculaire eleve (28-31 kda), probablement associe aux mitochondries, permettent de supposer une participation active de la ndpk aux processus de l'embryogenese somatique. En outre, les caracteristiques enzymatiques et les donnees immunologiques laissent supposer que les cals embryogenes et non-embryogenes de patate douce possederaient une pepc du type c3. Par ailleurs, des protoplastes issus de suspensions embryogenes a capacite de regeneration elevee, et cultives en milieux liquide ou solide, evoluent toujours vers la formation de structures non-embryogenes, montrant ainsi que le potentiel embryogene n'a pu etre maintenu a travers la culture de protoplastes de patate douce. Par consequent, cette situation nous a amene a developper, avec succes, un protocole alternatif de regeneration de protoplastes, qui consiste a induire d'abord la formation de racines sur des cals de protoplastes, puis la regeneration a partir des racines neoformees


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Informations

  • Détails : 191 P.
  • Annexes : 235 REF.

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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TH2014-012825
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