Separation de fragments d'adn double brin et de polynucleotides par electrophorese capillaire. Application a des echantillons biologiques

par URSULA VINCENT

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de P. GAREIL.

Soutenue en 1996

à Paris 6 .

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  • Résumé

    L'electrophorese capillaire en solutions de polymeres (cge) apparait bien adaptee a l'etude analytique de fragments de restriction d'adn ou de fragments d'adn amplifies par pcr dans des capillaires de silice greffes de facon covalente par des groupements apolaires de type methylpolysiloxane ou methylphenylpolysiloxane. Les fragments d'acides nucleiques ont ete separes dans une solution d'hydroxypropylmethylcellulose polydispersee de masse moleculaire moyenne 96 000 g/mol a une concentration proche du seuil d'enchevetrement du polymere. Il apparait ainsi qu'il n'est pas necessaire que le diametre de pore soit bien defini pour obtenir une bonne separation des acides nucleiques. Des derives de cellulose ayant une distribution de masses moleculaires plus etroite ont egalement ete etudies au regard de leur masse moleculaire et de leur viscosite. Les conditions les plus favorables du point de vue du compromis entre la resolution et le temps d'analyse correspondent a une cellulose de masse moleculaire elevee (seuil d'enchevetrement assez bas) utilisee a une concentration assez faible, proche de son seuil d'enchevetrement. Enfin, nos travaux ont permis de montrer la bonne adequation de l'electrophorese capillaire en solutions de polymeres enchevetres a la fois pour l'identification en taille de fragments d'adn amplifies par pcr et pour la quantification de bacteries grace a la technique de pcr competitive quantitative


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Informations

  • Détails : 267 P.
  • Annexes : 253 REF.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
  • Consultable sur place dans l'établissement demandeur
  • Cote : T Paris 6 1996 432
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 1996
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