Surexpression de c-fos dans la lignee murine monocytaire p388d1

par Ramine Mirahmadi

Thèse de doctorat en Biologie cellulaire et moléculaire

Sous la direction de Alain Pompidou.

Soutenue en 1996

à Paris 5 .


  • Résumé

    La lignee monocytaire murine p388d1 presentant les caracteristiques de macrophages matures a ete choisie comme modele de l'etude d'evenements resultant d'une surexpression du proto-oncogene c-fos. La proteine fos est (avec jun) un composant du facteur de transcription ap-1 qui intervient dans la regulation de nombreux genes. L'analyse, dans le laboratoire, de l'expression des antigenes du cmh de classe ii induite par l'interferon (ifn) gamma en presence du dibutyryl ampcyclique montrait un paralele entre l'effet inhibiteur de cet agent sur cette induction et sa capacite a stimuler la transcription de c-fos. L'hypothese d'un role de c-fos dans l'expression du chm ii nous a conduit a transfecter de maniere permanente les cellules de la lignee par un plasmide contenant le gene c-fos murin sous controle du promoteur metallothioneine humain iia. Plusieurs clones ont ete selectionnes par la resistance a la geneticine. L'analyse par southern blot a permis d'evaluer les niveaux d'integration. Trois clones ont ete retenus en vue d'analyser l'expression de c-fos en presence ou en absence de l'inducteur (cl#2cd 5x10#-#6 m pendant 6 heures). La surexpression de fos s'accompagne d'un effet negatif sur l'entree en phase s et entraine une augmentation correlative de l'antigene i-a#d a la surface des cellules en presence d'ifn gamma. La presentation d'un peptide dans le contexte i-e#d a ete determinee par l'evaluation de l'il-2 secrete par l'hybridome t approprie. Apres l'induction par l'ifn gamma et aux basses concentrations du peptide, une diminution de la presentation est observee pour les clones surexprimant fos, sans correlation directe entre le niveau de fos et l'inhibition.


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  • Détails : 1 vol. (91 f.)
  • Annexes : Bibliogr. f. 77-91

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