Transformation via agrobacterium tumefaciens du meleze hybride (larix leptoeuropaea) et regeneration de plants transgeniques

par VALERIE LEVEE

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de D. CORNU.

Soutenue en 1996

à Orléans .

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  • Résumé

    Une procedure de transformation genetique par agrobacterium tumefaciens a ete developpee a partir de masses embryogenes de meleze hybride. Apres coculture, le materiel transforme conserve ses proprietes embryogenes, ce qui a permis de regenerer et d'acclimater en serre des plants transgeniques. La transformation stable de ces plants est confirmee par analyses moleculaires. Le rendement de la procedure est d'environ six transformants par coculture. En vue de l'ameliorer, des facteurs lies a la coculture et a la selection ont ete etudies. Ainsi, nous observons sur ce rendement, un effet positif de certains genotypes et de l'inducteur de virulence alcool conifery lique additionne lors de la coculture. En revanche, le rendement de transformation est probablement limite par les conditions de selection appliquees. En effet, nous sommes contraints de maintenir une forte pression de selection afin d'eviter la regeneration de plantes chimeriques, possible du fait que les cocultures sont realisees a partir de tissus embryogenes deja organises. Or cette forte pression de selection elimine probablement un certain nombre d'evenements de transformation. Differentes methodes pour remedier au probleme des chimeres sont discutees. La mise au point d'une procedure de transformation stable et efficace du meleze hybride permettra d'introduire des genes en vue d'etudes fondamentales ou appliquees concernant des aspects specifiques aux coniferes


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  • Détails : 128 P.
  • Annexes : 144 REF.

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