Le petit arn nucleolaire u3 de la levure saccharomyces cerevisiae, structure et maturation du precurseur, structure de l'arn mature libre et au sein de la particule ribonucleoproteique u3

par ANNE GREGOIRE

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de C. BRANLANT.

Soutenue en 1996

à Nancy 1 .

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  • Résumé

    Mon travail de these a permis de montrer que le snorna u3 de s. Cerevisiae (implique dans les premieres etapes de maturation du pre-arn ribosomique) est constitue de deux domaines. Le domaine 3', presentant une structure a 4 branches et comprenant quatre des boites phylogenetiquement conservees du snorna u3, constitue, comme nous l'avons montre, le site de fixation des proteines de la snornp u3. Le domaine 5', de petite taille et peu structure, comporte deux sequences qui interagissent avec le pre-arn ribosomique: la boite a et un segment s'appariant a la region 5'ets. La majeure partie de la structure du snorna u3 est deja formee dans l'arn precurseur. Par ailleurs, l'intron du pre-snorna u3a comporte une longue structure tige/boucle centrale et des structures tige/boucle renfermant les sites 5' et 3' d'epissage. Notre observation d'une structure tige/boucle centrale dans les introns des pre-snorna u3 de differentes levures, mais aussi dans l'intron du pre-arnm de l'actine de s. Cerevisiae, est un argument fort en faveur de l'hypothese selon laquelle les longs introns chez s. Cerevisiae doivent avoir une structuration permettant de rapprocher spatialement le site 5' et la boite de branchement pour etre episses efficacement. Ce que nous avons pu ensuite demontrer par des experiences de mutagenese dirigee. L'implication des sites 5' et 3' du pre-snorna u3a dans une structure tige/boucle etait inattendue pour un arn fortement episse. Nous avons montre que, dans ce cas, la boite de branchement doit imperativement etre en simple brin. Tout renforcement de l'appariement en 5' bloque l'epissage. Par ailleurs, en produisant des pre-arn chimeriques entre pre-snorna u3a et pre-arnm de l'actine, nous avons constate de maniere tres inattendue que l'exon 2 tres structure du pre-snorna u3 augmentait l'efficacite d'epissage


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  • Détails : 424 P.
  • Annexes : 556 REF.

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