Role de l'operon huptuv dans la repression de la synthese de l'hydrogenase chez rhodobacter capsulatus

par SYLVIE ELSEN

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de A. COLBEAU.

Soutenue en 1996

à Grenoble 1 .


  • Résumé

    La nifehydrogenase de rhodobacter capsulatus est une metalloproteine membranaire, qui permet a la bacterie croissant en autotrophie, d'utiliser l'hydrogene comme sources d'electrons et d'energie. L'hydrogene sert d'inducteur de la synthese de l'hydrogenase et, en son absence, cette synthese est inhibee. Ce controle negatif implique les proteines hupt, hupu et hupv, codees par l'operon huptuv. L'expression de huptuv est faible, et deux fois plus elevee en heterotrophie qu'en autotrophie. La mutagenese du gene hupt par interposon entraine une forte expression des genes de structure hupslc de l'hydrogenase ; hupt est donc impliquee dans la repression de la synthese de l'enzyme. Hupt est homologue aux proteines histidine kinases des systemes de transduction du signal a deux composants. Elle est capable de s'autophosphoryler in vitro en presence de #3#2patp. Hupt phosphorylee possede une liaison n-phosphate et la proteine mutante hupt h217n est incapable de se phosphoryler ; ceci indique que hupt est une histidine kinase dont le site putatif de phosphorylation est l'his#2#1#7. Les genes hupu et hupv codent des proteines presentant des similarites de sequence avec, respectivement, la petite et la grande sous-unite des nifehydrogenases ; en particulier, les cysteines necessaires a la formation du site actif de l'hydrogenase sont conservees. L'inactivation de hupv par mutagenese par interposon, ou de hupu et hupv par deletion partielle, entraine une augmentation de la synthese de l'hydrogenase en heterotrophie en absence d'hydrogene ; hupu et hupv interviennent donc dans la repression de l'expression des genes hupslc. L'hypothese actuelle est que hupu et hupv, capables de detecter le stimulus hydrogene, declencheraient une cascade de regulation, impliquant l'histidine kinase hupt, conduisant a la repression de la synthese de l'hydrogenase en heterotrophie, en absence d'hydrogene


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  • Détails : 209 P.
  • Annexes : 203 REF.

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