Caracterisation de deux genes cuticulaires adulte-specifiques chez tenebrio molitor (insecte, coleoptere). Analyse du mode de regulation de leur expression par la 20-hydroxyecdysone

par CHRISTINE BRAQUART

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de J. DELACHAMBRE.

Soutenue en 1996

à Dijon .


  • Résumé

    Les insectes possedent une cuticule composee de chitine et de proteines synthetisees en majorite par l'epiderme sous-jacent. Cette cuticule est specifique de chaque stade du developpement post-embryonnaire de l'insecte. Les proteines constituant ces differentes cuticules (larvaires, nymphale ou adulte) sont donc specifiques de chaque stade, impliquant une reprogrammation genique de l'epiderme au cours de la metamorphose. Cette reprogrammation genique est regulee par 2 hormones que sont l'hormone juvenile et la 20-hydroxyectysone. L'etude des genes codant des proteines cuticulaires devrait donc permettre de comprendre la regulation hormonale de la metamorphose. Aussi, nous avons isole deux genes cuticulaires specifiques de la cuticule adulte denommes acp-20 et acp-22 chez l'insecte coleoptere tenebrio molitor. La sequence genomique et l'unite de transcription a ete determine pour ces deux genes qui presentent chacun deux petits introns dont le premier est localise dans la sequence codant le peptide signal. Le gene acp-22 est present en copie simple dans le genome de tenebrio alors que le gene acp-20 presente un polymorphisme de restriction au voisinage de sa sequence codante. L'analyse des sequences regulatrices a permis de localiser des sites potentiels de fixation pour des facteurs de transcription connus en utilisant la technique foot print in vivo par lmpcr, la caracterisation de ces differents sites a ete entreprise pour le gene acp-20. Ainsi ont pu etre localises des interactions adn/proteines dans les sequences 5' du gene acp-20. De meme, une analyse en culture in vitro a permis de mettre en evidence que la 20-hydroxyectysone regule, de maniere indirecte, l'expression du gene acp-20. Par contre, cette hormone n'a pas d'effet sur le gene acp-22


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  • Détails : 113 P.
  • Annexes : 246 REF.

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