Les polypeptides intrinseques du tonoplaste bobtip26 des cellules de chou-fleur (brassica oleracea var. Botrytis) : clonage de deux adnc et expression dans les tissus sous contraintes hydriques

par FRANCOIS BARRIEU

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de F. MARTY.

Soutenue en 1996

à Dijon .


  • Résumé

    Dans la perspective de mieux connaitre l'organisation fonctionnelle de la membrane vacuolaire (tonoplaste), nous avons etudie les proteines intrinseques du tonoplaste de 26 kda (ou bobtip26) des cellules du meristeme du chou-fleur (brassica oleracea l. Var. Botrytis). Une banque d'adnc a ete construite dans le vecteur d'expression lambda-gt 11 a partir des cellules en cours de vacuolisation du meristeme. Le criblage immunologique de la banque par un serum polyclonal monospecifique dirige contre les polypeptides tonoplastiques bobtip26 a permis d'isoler deux adnc (c26-1 et c26-2). Les sequences peptidiques putatives ont ete deduites. Chacune d'elles contient la sequence signature des proteines de la famille mip. Les sequences deduites qui correspondent respectivement aux proteines bobtip26-1 et bobtip26-2 sont tres similaires entre elles (94%) et tres similaires (90%) a celle de l'aquaporine gamma-tip du tonoplaste d'arabidopsis. L'injection d'arnc bobtip26-1 dans des ovocytes de xenope induit le gonflement des ovocytes et suggere que la proteine bobtip26-1 pourrait etre impliquee dans le transport de l'eau. Les transcrits codant les proteines bobtip26 ont ete localises par hybridation in situ. Ils sont particulierement abondants dans les cellules vivantes associees aux elements conducteurs (xyleme) et dans les cellules du meristeme. Dans les tissus soumis a des contraintes hydriques, l'abondance des transcrits est regulee. Les arnm bobtip26 et les polypeptides correspondants s'accumulent dans les tissus soumis a une dessiccation progressive. Il pourrait s'agir d'un mecanisme d'adaptation et/ou de defense des cellules confrontees a un deficit hydrique. Des phenomenes de vesiculisation intense ont ete correles aux modifications des patrons d'expression. Une integration fonctionnelle des reponses a l'echelle cellulaire devra etre exploree


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  • Détails : 182 P.
  • Annexes : 226 REF.

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