Etude comparee de la structure proteique, de l'activite enzymatique, de l'expression tissulaire et de la regulation genique de l'aldose reductase murine et d'une proteine apparentee : mvdp

par SYLVIANE DAOUDAL

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de G. VEYSSIERE.

Soutenue en 1996

à Clermont Ferrand 2 .

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  • Résumé

    Les cellules epitheliales du canal deferent de la souris synthetisent et secretent une proteine majoritaire de 34,5 kda: la m. V. D. P. (mouse vas deferens protein) qui est fortement apparentee a une classe d'oxydoreductases dependantes du nadph: les aldoses reductases. La mvdp purifiee a partir de cytosol de canaux deferents ne presente pas d'activite d'oxydoreduction significative vis a vis de substrats carbonyles tels que les aldehydes, aldoses ou steroides. Parallelement, l'arnm codant pour l'aldose reductase murine a ete isole a partir de rein de souris. La sequence en acides amines deduite a revele que l'ar murine et la mvdp presentaient 69% d'identite proteique. Dans la sequence primaire de la mvdp, tous les acides amines indispensables a la fixation du nadph et ceux impliques dans le mecanisme reactionnel de reduction d'un substrat carbonyle par l'aldose reductase sont conserves. L'aldose reductase murine et la mvdp surexprimees en bacteries sous forme de proteines de fusion, ont ete purifiees separement. Contrairement a l'ar murine recombinante, aucune activite de reduction du dl-glyceraldehyde n'a pu etre detectee pour la mvdp recombinante pure. In vivo, l'expression de la mvdp est limitee a la surrenale et au canal deferent. Dans ce dernier, la mvdp est abondante et son expression est fortement androgenodependante. L'aldose reductase murine est detectee dans de nombreux tissus a des niveaux d'expression plus faibles que ceux de la mvdp. L'expression de l'aldose reductase est stimulee par un stress hypertonique dans des cellules renales en culture. Un element de reponse a l'hypertonie: l'element tone a pu etre ainsi identifie dans la region 5'-flanquante du gene de l'aldose reductase murine


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  • Détails : 142 P.
  • Annexes : 270 REF.

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