Purification et caractérisation des Laccases de Marasmius Quercophillus

par Boghos Dedeyan

Thèse de doctorat en Chimie organique

Sous la direction de Gérard Gil.

Soutenue en 1996

à Aix-Marseille 3 .

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  • Résumé

    Marasmius quercophilus est un champignon de pourriture blanche, appartenant a la classe des basidiomycetes, qui se developpe sur des litieres de chene vert. Une souche de cette espece avait ete isolee, prealablement a ce travail, pour ses proprietes ligninolytiques et plus particulierement pour son activite enzymatique de type laccase detectee dans les milieux de culture apres croissance. Ce travail de these a eu pour but de purifier jusqu'a homogeneite, essentiellement par chromatographie d'echange d'ions, de filtration et d'affinite, les trois laccases secretees par cette souche. L'obtention des trois enzymes pures a permis une caracterisation complete de la laccase majoritaire, laccase 1, et une identification partielle des laccases 2 et 3. Ces laccases sont des glycoproteines monomeriques de masse molaire relative comprise entre 63 et 67 kda, presentant un point isoelectrique acide. Pour la laccase 1, les compositions en acides amines de la proteine et en sucres de la fraction glycosylee, ainsi que la structure primaire de l'extremite n-terminale ont ete determinees ; elles sont comparables a celles de laccases synthetisees par d'autres especes de champignons. Les parametres cinetiques etablis avec la syringaldazine, substrat specifique des laccases fongiques, montrent que la laccase 1 presente la plus grande affinite pour ce substrat. Enfin, les trois laccases purifiees sont capables d'une part de transformer les monomeres constitutifs de la lignine et, d'autre part, de degrader un ligninosulfonate de sodium de haut poids moleculaire.


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Informations

  • Détails : 147 p.
  • Notes : Thèse confidentielle à vie
  • Annexes : 185 REF.

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  • Bibliothèque : Université d'Aix-Marseille (Marseille. Saint-Jérôme). Service commun de la documentation. Bibliothèque de sciences.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : T 2541
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