Apport de constructions d'adn copie et d'oligonucleotides antisens a l'etude d'etapes critiques dans le cycle de deux flavivirus, le virus dengue type 2 et le virus amaril

par Hugues Tolou

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de J. NICOLI.

Soutenue en 1996

à Aix Marseille 2 .

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  • Résumé

    L'etude du mecanisme de la replication de l'arn genomique des flavivirus a ete abordee par deux approches, la construction d'un adnc infectieux d'une part, l'utilisation d'oligonucleotides antisens d'autre part. La construction de l'adnc du virus dengue 2 s'est heurtee a l'instabilite de deux regions de cet adn dans les systemes bacteriens utilises. Des constructions partielles ont cependant ete obtenues. Des oligonucleotides naturels complementaires de l'arn viral ont demontre une activite inhibitrice sur le cycle du virus amaril en culture de cellules. Nous avons confirme cette activite a l'aide d'oligonucleotides phosphorothioates. L'effet obtenu est peu marque et different selon l'espece virale. Il fait evoquer la possibilite que des etapes autres que la traduction de l'arn viral puissent etre la cible des molecules antisens. Nous nous sommes proposes de mettre au point un modele pour l'etude de l'action des antisens sur la transcription en introduisant dans des cellules infectees par un virus dengue 2 sauvage un arn viral defectif ampute d'une grande partie de la region codante. Apres avoir developpe une methode de detection specifique, nous n'avons pas observe de transcription de cet arn ou d'un arn de polarite inverse dans les cellules. Cette observation est discutee a la lumiere de celles effectuees dans d'autres laboratoires pour les flavivirus ou d'autres genres viraux


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  • Annexes : 113 REF.

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