Lipase, enzyme de pathogenicite ? approche enzymatique de la penetration cuticulaire de la baie de raison (vitis vinifera l. , cepage champenois du pinot noir) par l'agent de la pourriture grise botrytis cinerea pers. (teleomorphe botryotinia fuckeliana de bary)

par PASCAL COMMENIL

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Jean-Claude Audran.

Soutenue en 1995

à Reims .

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  • Résumé

    Durant le cycle vegetatif de la vigne (vitis vinifera l. ), la sensibilite au botrytis cinerea, l'agent responsable de la pourriture grise, augmente a partir de la veraison des baies. Nous avons explique en partie ce phenomene par l'etude du complexe cuticulaire qui met en evidence de larges modifications ultrastructurales (diminution de l'epaisseur et de la teneur en cutine) et biochimiques (mise en evidence, dans les cires cuticulaires, d'un inhibiteur de la germination des spores le botrytis cinerea). Lorsque l'epidemie se developpe, le parasite (spores et mycelium) peut percer directement la cuticule de la baie. Dans ce cas, l'intervention d'une lipase extracellulaire du botrytis cinerea en tant qu'enzyme de penetration a ete envisagee. Cette approche constitue un aspect novateur en matiere d'etude phytopathologique. La lipase a ete purifiee a homogeneite et ses proprietes physico-chimiques et enzymatiques ont ete determinees. La lipase est un monomere de 60 kda, de phi egal a 6. 5 et presentant, a 38c et a ph 6. 0, une forte specificite pour l'hydrolyse des esters d'acides gras insatures a longue chaine carbonee. Le sequencage partiel de la lipase a ete realise et permet d'envisager la construction d'une sonde nucleotidique qui servira a cloner le gene. Des anticorps polyclonaux diriges contre la lipase ont ete produits et purifies, ils presentent une reconnaissance immunologique specifique associee a une immunosuppression de l'activite enzymatique. Nos resultats montrent que la synthese de lipase est induite par la cutine des baies de raisin et par des composes presents dans les cires epicuticulaires. D'autre part, ils revelent des potentialites cutinolytiques non negligeables de cette proteine. Ces resultats nous permettent de proposer un schema dans lequel la lipase serait la premiere enzyme impliquee lors du processus enzymatique de penetration de la cuticule de la baie de raisin


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  • Détails : 186 P.
  • Annexes : 290 REF.

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