Caractérisation de transporteurs (efflux du saccharose, influx de peptides) impliqués dans la distribution des assimilats

par Maryse Laloi

Thèse de doctorat en Biologie et physiologie végétale

Sous la direction de Serge Delrot.

Soutenue en 1995

à Poitiers .


  • Résumé

    Par une approche biochimique realisee a poitiers nous avons caracterise l'efflux du saccharose a partir de vesicules de plasmalemme et par une approche de biologie moleculaire realisee a berlin, nous avons caracterise un transporteur d'oligopeptides. Le chargement du saccharose dans le complexe conducteur etant apoplastique chez de nombreuses plantes, le saccharose doit traverser la membrane des cellules de mesophylle avant d'etre charge dans le phloeme. Pour mieux comprendre le mecanisme de liberation du saccharose dans l'apoplaste, nous avons caracterise l'efflux de ce sucre a partir de vesicules de plasmalemme de feuilles de betterave sucriere (beta vulgaris) dans des conditions passives et energisees. L'etude en conditions passives a permis de mettre en evidence l'existence d'un transporteur different de celui de l'influx. En effet l'efflux est un phenomene saturable, sensible a differents inhibiteurs (n-ethylmaleimide, acide p-chloromercurybenzenesulfonique diethylpyrocarbonate) mais insensible a un serum anti-42 kda capable d'inhiber l'influx du saccharose dans des vesicules de plasmalemme. L'etude en conditions energisees a suggere l'existence de deux mecanismes possibles: un antiport proton/saccharose, l'efflux etant stimule par un gradient de ph normal (interieur alcalin) et dans ces conditions sensible a l'acide p-chloromercurybenzenesulfonique a la n-ethylmaleimide et au mersalyl. Un symport proton/saccharose, l'efflux etant stimule tres fortement par un gradient de ph inverse. L'antiport est le mecanisme qui vraisemblablement intervient in vivo. La complementation de mutants de levure a permis le clonage de plusieurs genes appartenant a differentes familles de transporteurs d'acides amines. Parmi eux, un gene ntr1 isole chez arabidopsis thaliana code pour une proteine membranaire ayant une tres faible activite de transport de l'histidine. La sequence d'acides amines de cette proteine est homologue a des sequences de transporteurs d'oligopeptides de differentes especes incluant arabidopsis. Un mutant de levure deficient en transport d'oligopeptides a ete construit et a permis de demontrer que ntr1 est un transporteur d'oligopeptides a haute affinite, responsable d'un transport actif, contre un gradient de concentration. Ce transporteur possede une tres large specificite et est exprime a un faible niveau dans les feuilles mais a un niveau beaucoup plus eleve dans les siliques en developpement. Son expression est restreinte a l'embryon ou elle est maximum au stade cur de l'embryogenese. Ntr1 joue donc un role dans l'approvisionnement en azote des embryons au cours de leur developpement


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Informations

  • Détails : 1 vol. (153 p.)
  • Annexes : 199 réf. bibliogr

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  • Bibliothèque : Université de Poitiers. Service commun de la documentation. Section Sciences, Techniques et Sport.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TS 95/POIT/2283
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