Strategie de couplage de proteines par des complexes organometalliques de metaux de transition lourds. Application en analyse structurale

par ABDELLAZIZ GORFTI

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de G. Jaouën.

Soutenue en 1995

à Paris 11 .

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  • Résumé

    Notre recherche doctorale s'est situee dans le cadre de developpement d'une nouvelle methode systematique de preparation de derives isomorphes, en combinant deux approches a savoir la fonctionnalisation de l'atome lourd sous forme d'ester active et l'utilisation du principe de l'atome masque sous forme de complexes organometallique. Dans la premiere partie, la preparation d'esters organometalliques de n-succinimidyle et de n-sulfosuccinimidyle de tungstene, de rhenium, de cobalt et de fer a partir des acides correspondants. Les acides et les esters de n-succinimidyle du tungstene ont ete cristallises et leur structure moleculaire a pu etre resolue par diffraction des rayons x. L'etude de la reactivite de ces esters a ete realisee sur diverses amines et dans des milieux reactionnels contenant un plus ou moins grand pourcentage d'eau. Les esters du tungstene et du rhenium reagissent pour former les amides attendus avec formation d'acide organometallique comme produit secondaire quand le milieu contient de l'eau. Le conjugue du rhenium-b-alanine a ete cristallise et sa structure resolue par diffraction des rayons x. Dans la deuxieme partie, une etude complete de la reactivite des esters du rhenium et du tungstene a ete realisee d'abord sur l'albumine de serum bovin (bsa), puis sur le lysozyme d'uf de poule. L'effet des facteurs comme le ph, la quantite de marqueur introduite, la concentration en proteine et la quantite de cosolvant a ete etudie pour la bsa. Les conjugues ont ete caracterises par ir, uv et electrophorese. Pour le lysozyme, l'influence du ph sur le couplage a ete etudiee et les differents conjugues ont ete analyses par chromatographie d'echange de cations et par electrophorese. Il a ete ainsi montre la formation de plusieurs conjugues mono-marques et di-marques separables par chromatographie ainsi qu'une possible specificite de site selon le ph reactionnel


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Informations

  • Détails : 143 P.
  • Annexes : 88 REF.

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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TH2014-012319
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