Expression de la sous-unite a 15 kda du mediatophore dans l'ovocyte de xenope. Localisation et role dans le mecanisme de liberation de l'acetylcholine

par Christine Leroy

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de F.-M. MEUNIER.

Soutenue en 1995

à Paris 11 .

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  • Résumé

    L'injection d'arnm dans les ovocytes de xenope a ete utilisee pour essayer de reconstituer le mecanisme de liberation de l'acetylcholine. Des ovocytes injectes avec l'ensemble des arnm cholinergiques extraits du lobe electrique de la torpille sont capables de synthetiser, d'accumuler et de liberer le neurotransmetteur a la suite d'un influx calcique. Cette liberation possede des proprietes tres semblables a celles observees a la synapse. Par ailleurs, ces ovocytes expriment la sous-unite a 15 kda du mediatophore, une proteine presynaptique oligomerique isolee et purifiee a partir de l'organe electrique de la torpille et qui apres reconstitution dans des proteoliposomes est capable de transporter l'acetylcholine. L'introduction d'une sonde anti-sens dirigee specifiquement contre la sequence nucleotidique de la sous-unite a 15 kda du mediatophore inhibe a la fois la synthese de cette proteine ainsi que la liberation d'acetylcholine dans ces ovocytes. La presence de cette sous-unite a 15 kda, de nature proteolipidique, semble donc indispensable a la fonction de liberation de l'acetylcholine. Cependant, l'activite de transport du neurotransmetteur n'a pu etre obtenue apres l'unique expression du proteolipide a 15 kda dans les ovocytes de xenope. Une des explications possibles serait la difference de localisation de la sous-unite a 15 kda exprimee dans les deux types d'ovocytes injectes. Par immunofluorescence et fractionnement subcellulaire, nous avons en effet montre que le proteolipide a 15 kda, exprime dans des ovocytes injectes avec les arnm totaux, etait localise dans la membrane plasmique. Par contre, cette meme proteine est localisee dans la membrane de granules cytoplasmiques (golgi) lorsqu'elle est exprimee dans des ovocytes injectes avec le transcrit seul


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  • Détails : 155 P.
  • Annexes : 180 REF.

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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
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  • Cote : TH2014-012257
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