Comparaison des embryogeneses zygotique et somatique chez la carotte (daucus carota l. ). Identification et induction de proteines de maturation

par VALERIE DODEMAN

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de G. DUCREUX.

Soutenue en 1994

à Paris 11 .

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  • Résumé

    Notre objectif etait d'etudier la maturation des embryons somatiques de carotte en focalisant notre interet sur l'accumulation, naturelle ou artificielle, de proteines de reserve. Une premiere analyse individuelle des embryogeneses zygotique (de l'akene a la plantule) et somatique (du stade suspension cellulaire embryogene a la plantule) a ete conduite. Une deuxieme analyse comparative entre les deux types d'embryogenese a ensuite ete effectuee. Enfin, differents inducteurs de la maturation ont ete testes afin de trouver des conditions telles que le profil de l'embryon somatique mime celui de l'embryon zygotique. Differentes techniques d'analyse des proteines ont ete exploitees: l'etude des isozymes, des proteines totales par electrophorese monomensionnelle et essentiellement par electrophorese bidimensionnelle, et la detection immunologique ; les proteines majoritaires ont ete caracterisees par microsequencage. Chez l'embryon zygotique, une proteine de reserve de 50 kd, nommee la daucine, a ete identifiee comme etant de type globuline ainsi qu'une proteine de 25 kd, identifiee comme une proteine lea de type rab. Ces proteines ne se retrouvent pas dans le profil de l'akene dans lequel des globulines de 30 et 90 kd ont ete identifiees ainsi qu'une b-1,3-glucanase de 42 kd ; des glycoproteines de 58 kd ont egalement ete mises en evidence. En ce qui concerne l'embryogenese somatique sensu lato, la comparaison, par ebd, des stades de l'expression et de l'induction de l'embryogenese fait apparaitre une discontinuite qui est progressivement attenuee au cours du developpement de l'embryon somatique. Les relations de proximite entre les differents stades ont ete traduites sous la forme d'un arbre non racine. L'eventuel role des auxines sur les phases d'induction et d'expression de l'embryogenese a ete discute. Les embryogeneses zygotique et somatique ont ete comparees par les memes approches. Il apparait que si l'embryon somatique est ontogeniquement voisin de l'embryon zygotique, leurs profils proteiques sont distincts ; par ailleurs, la plantule somatique s'apparente a la plantule zygotique de 5 jours seulement apres passage sur milieu gelose pendant 10 jours. L'accumulation de reserves proteiques ou amylacees a ete obtenue dans l'embryon somatique sous l'action de differents inducteurs de maturation tels que l'aba et le stress hydrique. La daucine, la rab25 ainsi que d'autres marqueurs zygotiques ont en particulier ete induits. Un modele preliminaire de cinetique d'expression de ces proteines a ete propose sur la base de ces donnees experimentales

  • Titre traduit

    Comparing zygotic and somatic embryogenesis in carrot (daucus carota l. ). Identification and induction of maturation proteins


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Informations

  • Détails : 284 P.
  • Annexes : 323 REF.

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