Les allergenes de pollen de graminee. Etude du repertoire, purification et caracterisation des allergenes de dactylis glomerata

par VIRGINIE LEDUC-BRODARD

Thèse de doctorat en Sciences médicales

Sous la direction de G. PELTRE.

Soutenue en 1995

à Paris 7 .

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  • Résumé

    Le repertoire des allergenes du pollen de dactylis glomerata, graminee tres bien representee en france, a ete etudie par electrophorese bidimensionnelle a haute resolution (en gradients de ph immobilises) suivie d'immuno-empreinte. Les immunoglobulines de type e de patients allergiques ont permis de detecter une centaine de taches peptidiques allant de point isoelectrique 4 a 10 et de masse moleculaire allant de 60 a 6 kda. Les allergenes majeurs, reconnus par plus de 50% des patients allergiques etudies, ont ete purifies par isoelectrofocalisation preparative suivie de chromatographie liquide d'exclusion. Des sequences en acides amines ont permis, par rt-pcr, de cloner le gene de dac g 3 et d'exprimer une proteine recombinante possedant les memes epitopes reconnus par les ige que ceux de la proteine naturelle. Des anticorps monoclonaux de souris ont ete produits contre dac g 4, un allergene majeur caracterise par un point isoelectrique basique (10,4) et une masse moleculaire de 59,2 kda. Un anticorps monoclonal a permis de purifier dac g 4 par chromatographie d'affinite et de detecter des proteines de masse moleculaire semblable dans des pollens de diverses especes de graminees. Une carte epitopique de dac g 4 a ete dressee montrant la presence d'au moins quatre epitopes differents dont trois sont non chevauchants. Les affinites de ces anticorps ont ete comparees a celles des ige humaines qui se sont revelees avoir des affinites beaucoup plus elevees


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Informations

  • Détails : 155 P.
  • Annexes : 332 REF.

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  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • Accessible pour le PEB
  • Cote : TS1995
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