Contribution a l'etude fonctionnelle de la vimentine par mutagenese dirigee in vivo chez la souris

Studies on biological functions of vimentin using targeted mutagenesis by homologous recombination in embryonic stem cells

• Auteur / Autrice : Emma Colucci-Guyon
• Direction : Charles Babinet
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

La vimentine appartient a la famille multigenique des filaments intermediaires (fi) et est exprimee de maniere specifique durant le developpement. En vue d'etudier son role biologique in vivo, nous avons utilise la methode de recombinaison homologue dans les cellules souches embryonnaire es pour inactiver le gene codant la vimentine. Deux lignees mutantes ont ete creees l'une incluant le gene de la -galactosidase comme gene rapporteur. Cette derniere a permis d'etudier d'une facon approfondie le patron d'expression du gene vimentine pendant le developpement de l'animal. A notre grande surprise, nous avons observe que les souris porteuses d'une mutation nulle dans le gene de la vimentine semblent se developper et se reproduire normalement. De plus, la recherche d'un autre type de fi qui compenserait l'absence de vimentine s'est revelee negative. Dans une deuxieme serie d'experiences, nous avons pu montrer que l'absence de vimentine a des consequences sur la formation du reseau de gfap (proteine acide des gliofilaments) dans des types cellulaires qui coexpriment ces deux proteines ; la gfap dans ces cellules est indecelable sous forme de reseau. Au moins pour certains types cellulaires, ces souris sont depourvues non seulement d'un reseau de vimentine, mais egalement d'un reseau de gfap. L'absence apparente de phenotype de ces souris n'en est que plus intriguante et conforte l'idee qu'il reste a identifier les situations ou un phenotype se manifesterait. Notre conviction est que la vimentine n'a pas ete conservee au fil de l'evolution par erreur et que donc elle doit etre necessaire d'une maniere ou d'une autre a l'organisme. Le modele animal que nous avons realise est un outil privilegie pour tester d'autres hypotheses sur le role biologique de la vimentine